酶的提取和分離純化
(一)細(xì)胞破碎處理
許多酶都存在于細(xì)胞內(nèi)。為了提取這些胞內(nèi)酶，首先需要對(duì)細(xì)胞進(jìn)行破碎處理。細(xì)胞破碎的方法很多，主要包括機(jī)械破碎法、物理破碎法、化學(xué)破碎法和酶學(xué)破碎法等。
機(jī)械破碎法是指利用搗碎機(jī)、研磨器或勻漿器等將細(xì)胞破碎。物理破碎法是指利用溫度差、壓力差或超聲波等將細(xì)胞破碎。化學(xué)破碎法是指利用甲醛、丙酮等有機(jī)溶劑或表面活性劑作用于細(xì)胞膜，使細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)遭到破壞或透性發(fā)生改變。酶學(xué)破碎法是指選用合適的酶，使細(xì)胞壁遭到破壞，進(jìn)而在低滲溶液中將原生質(zhì)體破碎。
(二)提取
酶的提取是指在一定條件下，用適當(dāng)?shù)娜軇┨幚砑?xì)胞破碎后的含酶原料，使酶充分地溶解到提取液中的過程。酶的提取方法有過柱法、鹽溶液提取法、堿溶液提取法和有機(jī)溶劑提取法等。為了提高酶的提取率和防止酶提取后變性失活，提取過程中必須注意保持適宜的溫度和pH值，并且添加適量的保護(hù)劑。
(三)分離
提取液中含有多種酶，要想從提取液中分離純化出某一種酶，必須根據(jù)這種酶的特性，選擇合適的分離純化方法。酶分離純化的方法很多，可利用酶相對(duì)分子質(zhì)量的大小進(jìn)行分離純化，如通過透析的方法分離酶等。
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