蛋白質(zhì)沉淀反應(yīng)—加熱沉淀蛋白質(zhì)
實(shí)驗(yàn)原理
大多數(shù)蛋白質(zhì)在加熱時(shí)，由于空間結(jié)構(gòu)被破壞而喪失其穩(wěn)定性，因此變性凝固。
蛋白質(zhì)的熱變性作用與加熱時(shí)間平行，并隨溫度的升高而加快。
短時(shí)間加熱可引起凝固。加熱時(shí)，鹽類(lèi)的存在及溶液酸堿度對(duì)蛋白質(zhì)的凝固有很大影響。
處于等電點(diǎn)狀態(tài)的蛋白質(zhì)加熱時(shí)凝固最完全、最迅速。在強(qiáng)酸強(qiáng)堿溶液中，蛋白質(zhì)分子帶有正電荷或負(fù)雖加熱也不凝固。
但溶液中若有中性鹽存在，則蛋白質(zhì)可因加熱而凝固。
試劑
1.蛋白質(zhì)溶液(與雙縮脲反應(yīng)相同)
2.1％醋酸溶液
3.10％醋酸溶液
4.10％氫氧化鈉溶液
5. 飽和氯化鈉溶液
實(shí)驗(yàn)操作
取試管4支依下表所示添加 試劑 。
試劑 | 管號(hào) | |||
1 | 2 | 3 | 4 | |
蛋白質(zhì)樣液(ml) | 1.0 | 1.0 | 1.0 | 1.0 |
1% 醋酸，滴 | 1 | — | — | — |
10% 醋酸，滴 | — | 10 | — | — |
10% NaOH，滴 | — | — | 10 | — |
蒸餾水，滴 | 10 | 1 | 1 | 11 |
現(xiàn)象 | ||||
加畢混勻，觀(guān)察各管的情況。
然后放入沸 水浴 中加熱10分，注意觀(guān)察比較各管的沉淀情況。
其中2號(hào)管溶液接近于蛋白質(zhì)等電點(diǎn)，最不穩(wěn)定，最先沉淀；
其次是第一管；3號(hào)和4號(hào)管因在較強(qiáng)的酸或堿下，蛋白質(zhì)帶有大量的電荷，雖然加熱也不沉淀。
向第三管中加入少許飽和氯化鈉溶液，立即出現(xiàn)白色沉淀。
北京天優(yōu)福康生物科技有限公司
官網(wǎng)：http://www.gzs9.cn/
服務(wù)熱線(xiàn)：400-860-6160
聯(lián)系電話(huà)/微信：13718308763
QQ:2136615612 3317607072
E-mail：Tianyoubzwz@163.com
