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內切酶和外切酶
發布日期:2025-12-04 16:45:17


內切酶和外切酶


如果單純從簡單稱呼上看,一字之差確實讓人犯迷糊,關鍵字在內外之上,這里的內外其實是針對核酸鏈而言的。
先看內切酶,根據是否有序列識別差異分為限制性內切酶和非特異內切酶,前者代表如EcoRI, BamHI, HindIII等;后者有DNase I, RNase A等。
值得一提的是,限制內切酶算是分子生物學里面最偉大的發現之一了,直接推動了整個學科的發展,為后續科學家靈活“編輯”目標序列奠定了理論基礎。
我們可以把DNA或RNA想象成一條長長的珍珠項鏈,每顆珍珠就是一個核苷酸,而連接珍珠的線就是磷酸二酯鍵,內切酶的作用即在此。
內切酶是將一段長片段處理為多個小片段。限制性內切酶是基因克隆的基石,我們用它來特異性切割質粒DNA和目標基因,然后將基因片段插入質粒,構建重組DNA分子。
外切酶一般是從核酸鏈末端(如3‘端或5’端) 逐個水解核苷酸,沒有嚴格的序列特異性,作用于末端,最后得到的產物是單個核苷酸,如大腸桿菌外切酶 I(Exo I)或牛脾磷酸二酯酶。
在細胞內,外切酶參與DNA損傷修復。例如,在復制后,外切酶可降解RNA引物,并為DNA鏈的準確連接做好準備。或利用外切酶III(Exo III)的部分降解作用,可將雙鏈DNA處理出單鏈區,用于制備放射性標記的DNA探針。