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RNaseH和RNaseA
發布日期:2025-12-04 16:48:13



RNaseH和RNaseA


這兩個都是上面提到的非特性內切酶,都是PCR相關實驗中的??土?,但H和A一字之差,用處卻天壤之別?!癏” 非常直接地代表了 “雜交”,英文是Hybrid,專門降解 DNA-RNA 雜交鏈中的 RNA鏈;


RNase A(核糖核酸酶A)來源于牛胰臟,是最早被深入研究的核糖核酸酶之一。因其在牛胰臟中被首次發現并作為該類酶的典型代表,故命名為“RNase A”,其中“A”可能是按發現順序或分類習慣賦予的標識。
RNase H 特點是專一性水解 DNA-RNA 雜交鏈 中的 RNA 鏈,產生帶有5‘-磷酸和3’-羥基末端的寡核苷酸,而對單鏈或雙鏈的DNA/RNA均無影響。
在DNA復制中去除RNA引物,維持基因組穩定性,如cDNA合成,即在逆轉錄過程中,RNase H可用于去除mRNA模板,或在合成cDNA第二鏈前去除第一鏈合成中的mRNA。
RNase A主要降解單鏈RNA,它能特異性地在嘧啶堿基(胞嘧啶C和尿嘧啶U)的3’末端進行切割,一個非常突出的特點是其極高的穩定性,即便在高溫或變性劑處理后也容易復性。
在細胞內負責清除不再需要的RNA,典型應用是在提取質粒DNA或基因組DNA時,加入RNase A可以高效降解樣品中的RNA污染物(如核糖體RNA、tRNA),從而獲得高純度的DNA制品。