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DNA聚合酶與連接酶

發布日期：2025-12-04 16:47:17

DNA聚合酶與連接酶

聚合酶常被稱為Taq酶，其作用是合成新DNA鏈，像“裝配工”逐個添加核苷酸，它有兩個作用的前提或機制，一方面必須以一條DNA鏈為模板進行互補配對，其二是只能沿5‘→3’ 方向催化合成新鏈。在分子實驗中，它經常用于DNA復制、PCR擴增、DNA修復與校正。

聚合酶的代表有普通Taq酶和Pfu 聚合酶，后者具有3‘→5’外切酶校正活性（通常叫高保真酶），意味著它在合成DNA時能及時發現并糾正錯配的堿基，因此保真度更高，常用于需要高準確度的克隆和測序。

（聚合酶原理圖）

DNA連接酶識別的是片段的末端結構，不需要模板，也沒有方向性，其作用于兩個DNA片段（一個片段的3'-OH與另一個片段的5'-P）。代表產品有T4 DNA連接酶，它不僅能連接具有互補單鏈突出的粘性末端，也能連接切口平整的平末端（盡管效率較低），應用非常廣泛。

簡而言之，DNA聚合酶就像是在一條已有的軌道（模板鏈）旁邊，從頭開始鋪設新的并行軌道。它嚴格遵循舊軌道的走向（堿基互補配對），一塊接一塊地鋪上新枕木（核苷酸）。

DNA聚合酶就像是在一條已有的軌道（模板鏈）旁邊，從頭開始鋪設新的并行軌道。它嚴格遵循舊軌道的走向（堿基互補配對），一塊接一塊地鋪上新枕木（核苷酸）。