唐菖蒲伯克霍爾德氏菌（椰毒假單胞菌酵米面亞種）檢驗(yàn)解決方案
“椰毒假單胞菌”，全稱椰毒假單胞酵米面亞種Pseudomonas cocovenenans subsp. Farinofermentans，是一種存在于酵米面、變質(zhì)鮮銀耳及其他淀粉類發(fā)酵產(chǎn)品中的食源性致病菌，
由于椰毒假單胞酵母菌酵米面亞種不是國(guó)際公開(kāi)發(fā)表和承認(rèn)的細(xì)菌分類科學(xué)名稱，1999年劃分為唐菖蒲伯克霍爾德氏菌Burkholderia gladioli的一個(gè)病原型，目前現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)GB/T 4789.29-2003《食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn) 椰毒假單胞菌酵米面亞種檢驗(yàn)》。2018年9月國(guó)家衛(wèi)生健康委員會(huì)發(fā)布的《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 唐菖蒲伯克霍爾德氏菌（椰毒假單胞菌酵米面亞種）檢驗(yàn)（征求意見(jiàn)稿）》中，將該菌進(jìn)行更名，同時(shí)新增分離培養(yǎng)基mPDA同PCFA用于唐菖蒲伯克霍爾德氏菌（椰毒假單胞菌酵米面亞種）的分離。
具體檢驗(yàn)流程如下：
1. 檢驗(yàn)流程（前增菌以及選擇性分離過(guò)程）
2. 檢驗(yàn)流程初篩實(shí)驗(yàn)
自選擇性瓊脂平板上分別挑取5個(gè)以上典型或可疑菌落，分區(qū)劃線卵黃瓊脂平板，36℃±1℃培養(yǎng)。挑取培養(yǎng)18～24 h的菌落進(jìn)行革蘭氏染色及氧化酶試驗(yàn)。對(duì)于革蘭氏染色陰性、氧化酶試驗(yàn)陰性的菌繼續(xù)培養(yǎng)至48 h±2 h，對(duì)于卵磷脂酶陽(yáng)性，帶有虹彩環(huán)的單個(gè)菌落，接種PDA平板，36℃±1℃培養(yǎng)24 h±2 h。、
唐菖蒲伯克霍爾德氏菌恒溫?zé)晒鈹U(kuò)增試劑盒快速檢測(cè)法
1. 技術(shù)原理：利用兩對(duì)特殊引物和具有鏈置換活性的BstDNA聚合酶，使模板兩端引物結(jié)合處循環(huán)出現(xiàn)環(huán)狀單鏈結(jié)構(gòu)，引物順利與模板結(jié)合并進(jìn)行鏈置換擴(kuò)增反應(yīng)，實(shí)現(xiàn)在恒溫條件下（60~65℃）進(jìn)行連續(xù)快速擴(kuò)增。反應(yīng)加入顯色指示劑，陰陽(yáng)性結(jié)果顯色差異顯著，可直接通過(guò)顏色變化判讀結(jié)果。
2. 產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)
操作簡(jiǎn)便：簡(jiǎn)單加樣操作，快速上手；
快速省時(shí)：獲得菌液后1 h完成檢測(cè)
靈敏度高：最低檢測(cè)限8CFU。
特異性強(qiáng)：利用靶基因序列上的多個(gè)獨(dú)立區(qū)域設(shè)計(jì)多條引物，保證擴(kuò)增反應(yīng)的高度特異性
結(jié)果簡(jiǎn)單可視：肉眼觀察顏色，可判斷結(jié)果。
3. 產(chǎn)品組分：
組分名稱 | 規(guī)格×數(shù)量 |
唐菖蒲伯克霍爾德氏菌檢測(cè)試劑（凍干） | 3排× 8管 |
復(fù)溶液 | 650 μL × 1管 |
陽(yáng)性對(duì)照（凍干） | 1管 |
陰性對(duì)照（凍干） | 1管 |
裂解液 | 1 mL × 1管 |
顯色指示劑 | 80 μL×1管 |
超純水 | 1 mL×1管 |
4. 過(guò)程圖解：
相關(guān)產(chǎn)品信息
用途 | 產(chǎn)品名稱 |
快速檢驗(yàn)和鑒定 | 唐菖蒲伯克霍爾德氏菌核酸快速檢測(cè)試劑盒 核酸快速檢測(cè)試劑盒 |
選擇性增菌 | GVC增菌液 |
分離培養(yǎng) | 改良馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（mPDA） |
PCFA培養(yǎng)基基礎(chǔ) | |
PCFA培養(yǎng)基配套試劑 | |
卵磷脂酶試驗(yàn) | 卵黃瓊脂基礎(chǔ)（適應(yīng)GB4789.29-2003） |
卵磷脂酶試驗(yàn) | 卵黃瓊脂基礎(chǔ)（適應(yīng)GB4789.29修訂意見(jiàn)稿） |
純培養(yǎng) | 馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基 |
形態(tài)觀察 | 革蘭氏染色液 |
氧化酶試驗(yàn) | 氧化酶試劑 |
動(dòng)力試驗(yàn)和產(chǎn)毒素試驗(yàn) | 馬鈴薯葡萄糖半固體瓊脂 |
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