雙報告基因系統(tǒng)
在多重發(fā)光測試中,信號是同時產(chǎn)生,測試是獨立進(jìn)行??梢詼y試不同的發(fā)光動力學(xué)反應(yīng)或不同的發(fā)射光波??蛇x擇的是,反應(yīng)也可以按順序被促發(fā),如商業(yè)化的 Promega 公司提供的 Renilla 和 Firefly 熒光素酶雙報告基因試劑。雙報告系統(tǒng)的原理如 Figure 1b.
雙重分析的 BL/CL 分析采用連續(xù)的閃爍型( Flash )發(fā)光形式,如發(fā)光蛋白水母蛋白和 acridinium-9-carboxamide 標(biāo)記。這種方法可以在一個反應(yīng)管里定量兩個分析物和測試兩個發(fā)光反應(yīng)。因為它建立在 flash 型的發(fā)光上,分析測試需要非常短的時間,所以適用于高通量的篩選。
BL/CL 雙功能分子
目前已有報道,一個雙功能的分子既可以作為螢火蟲熒光素酶的底物,又可以作為 HRP 的底物。通過這種方法,因為不同的發(fā)光光譜,就可在同一個反應(yīng)孔中可以用兩個酶標(biāo)記并獨立測試。
通過編碼 BL 酶的基因或發(fā)光蛋白基因與第二個基因(編碼結(jié)合蛋白,如蛋白 A ,蛋白 G ,鏈霉親和素,或生物素受體肽)形成融合蛋白可以廣泛用于免疫分析或免疫印跡 。
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