微生物實(shí)驗(yàn)室MDD管理

1. 前言

規(guī)定MDD的處理流程，以保證MDD得到正確的控制和處理，本文參考了中國藥典，PDA TR88等資料進(jìn)行了編寫，針對(duì)第一階段微生物實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部調(diào)查，不涉及第二階段生產(chǎn)階段調(diào)查。微生物MDD，更多取決于前期對(duì)各個(gè)環(huán)節(jié)的風(fēng)險(xiǎn)識(shí)別及風(fēng)險(xiǎn)控制，做好實(shí)驗(yàn)室每處的細(xì)節(jié)，可以有效減少不必要的MDD的發(fā)生。

2. 適用范圍

適用于非無菌產(chǎn)品、無菌檢測、細(xì)菌內(nèi)毒素檢測、環(huán)境監(jiān)測、工藝用水及壓縮空氣等公共系統(tǒng)的微生物監(jiān)測。

3. 定義

3.1. 偏差：超出預(yù)期范圍或未滿足需求的數(shù)據(jù)或結(jié)果。

3.2. 環(huán)境監(jiān)測偏離（Environmental Monitoring Excursion）：監(jiān)測結(jié)果達(dá)到或超過警戒水平或行動(dòng)限度的非活性微粒和/或微生物。

3.3. MDD：微生物數(shù)據(jù)偏差（Microbial Data Deviation），指的是超出注冊(cè)批準(zhǔn)、官?藥典、GMP 或公司內(nèi)控的產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)或驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)的微?物測試結(jié)果。包括但不限于環(huán)境和制藥用水監(jiān)測以及藥用原料、中間品和成品測試期間產(chǎn)?的結(jié)果。

3.4. 超標(biāo)結(jié)果（Out of Specification Result）：藥用原料、原料藥或產(chǎn)品批中，不符合任何監(jiān)管放行和保質(zhì)期規(guī)范標(biāo)準(zhǔn)的任何無法解釋的偏差或失敗。

3.5. 風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估：用以支持在風(fēng)險(xiǎn)管理中做出的決定的一種系統(tǒng)的信息組織過程，風(fēng)險(xiǎn)管理過程包括識(shí)別危害和分析、評(píng)價(jià)與接觸這些危害有關(guān)的風(fēng)險(xiǎn)。

4. 程序

4.1. MDD和OOS的區(qū)別及MDD的特點(diǎn)

4.1.1.OOS僅指涉及最終產(chǎn)品質(zhì)量的偏差，而MDD指的是實(shí)驗(yàn)室的所有微生物數(shù)據(jù)偏差，與OOS調(diào)查相比，MDD調(diào)查涉及的范圍也更廣，對(duì)調(diào)查人員的專業(yè)知識(shí)和技能要求更為苛刻。

4.1.2.實(shí)驗(yàn)室MDD調(diào)查要比OOS調(diào)查的難度大，這種難度主要由于微生物本身特點(diǎn)、試驗(yàn)時(shí)間長和實(shí)驗(yàn)室誤差所導(dǎo)致。

4.1.3.微生物在檢品不同包裝容器或同一包裝容器的不同部位之間可能分布不均勻，這些特性使得微生物檢驗(yàn)結(jié)果易于偏離預(yù)期值和MDD調(diào)查難度大的原因之一。

4.1.4.與化學(xué)試驗(yàn)相比，微生物試驗(yàn)需要時(shí)間較長，當(dāng)發(fā)現(xiàn)一個(gè)可能的MDD時(shí)，已是試驗(yàn)開始后的幾天或幾周之后，試驗(yàn)樣品已不復(fù)存在，所有的MDD調(diào)查只能從記錄文件著手。

4.2. 微生物學(xué)家的作用

有豐富經(jīng)驗(yàn)的微生物學(xué)家可以提供專門的微生物知識(shí)，有助于調(diào)查開展，來確定MDD的根本原因。

4.3. 流程

4.3.1.MDD的發(fā)現(xiàn)

微生物實(shí)驗(yàn)室MDD的發(fā)現(xiàn)來源于審核記錄，員工觀察，質(zhì)量部審計(jì)，外部審計(jì)等。

4.3.2.MDD的發(fā)起

4.3.2.1.發(fā)起人發(fā)現(xiàn)潛在MDD，先判斷有無實(shí)際意義，如果數(shù)據(jù)沒有意義則要判斷是否是由數(shù)據(jù)錄入等常見的易于改正的錯(cuò)誤導(dǎo)致，如確定由該類錯(cuò)誤導(dǎo)致，就立即改正并結(jié)束調(diào)查。

4.3.2.2.如果數(shù)據(jù)有意義或沒有意義又不存在該類錯(cuò)誤，則應(yīng)在1個(gè)工作日內(nèi)告知微生物主管，如遇節(jié)假日，應(yīng)在第一個(gè)工作日開始告知。

4.3.2.3.微生物主管接到通知后，應(yīng)在一個(gè)工作日內(nèi)通知質(zhì)量部，質(zhì)量部接到通知后，啟動(dòng)MDD調(diào)查。

4.3.2.4.MDD的關(guān)閉，應(yīng)在1個(gè)月內(nèi)完成，若延期則需要書面申請(qǐng)并說明延期理由。

4.3.2.5.緊急糾正

質(zhì)量部接到通知后評(píng)估是否需要采取緊急糾正。緊急糾正的措施包括并不限于：隔離產(chǎn)品/樣品，設(shè)備停止使用，廢棄產(chǎn)品等。

4.3.3.記錄MDD

4.3.3.1.MDD編號(hào)規(guī)則

MDD-YYYY-XXX，MDD表示Microbial Data Deviation代表微生物數(shù)據(jù)偏差，YYYY代表4位年份，XXX代表3位流水號(hào)。如MDD-2022-002表示2022年第二份微生物數(shù)據(jù)偏差。

4.3.3.2.質(zhì)量部接到通知后當(dāng)天為MDD分配一個(gè)編號(hào)，并給到發(fā)生偏差的部門。

4.3.3.3.在兩個(gè)工作日內(nèi)，將填寫好的MDD通知單交給質(zhì)量部。

4.3.3.4.質(zhì)量部和技術(shù)專家對(duì)事件的風(fēng)險(xiǎn)性進(jìn)行評(píng)估。

4.3.3.4.1.風(fēng)險(xiǎn)水平的定義通常結(jié)合危害發(fā)生的可能性和嚴(yán)重性，分為次要MDD和重要MDD，評(píng)估后質(zhì)量部將對(duì)MDD進(jìn)行分類。

4.3.3.4.2.MDD的處理必須同其風(fēng)險(xiǎn)水平相當(dāng)。

4.3.3.5.應(yīng)說明事件造成的后果：

比如風(fēng)險(xiǎn)輕微，可在現(xiàn)場糾正，危害健康或安全，產(chǎn)品損失，法規(guī)問題，如警告信，產(chǎn)品召回，報(bào)告國家食品藥品監(jiān)督管理局/美國FDA/歐盟藥監(jiān)局等。

4.3.4.緊急糾正

4.3.4.1.目的：

糾正問題，停止MDD繼續(xù)進(jìn)行，抑制危害，對(duì)所有潛在受影響的產(chǎn)品加強(qiáng)控制。

4.3.4.2.緊急糾正采取的措施：

當(dāng)需要采取緊急糾正時(shí)，可以采取隔離產(chǎn)品/樣品，通知質(zhì)量部，設(shè)備停止使用，廢棄產(chǎn)品等措施。

4.4. 微生物實(shí)驗(yàn)室調(diào)查

4.4.1.微生物鑒定

識(shí)別與產(chǎn)品失敗有關(guān)的微生物是實(shí)驗(yàn)室調(diào)查的關(guān)鍵步驟，也是隨后生產(chǎn)調(diào)查的關(guān)鍵步驟，對(duì)微生物來源的了解可能有利于確定那種微生物污染了產(chǎn)品的可能途徑。

4.4.2.調(diào)查關(guān)鍵點(diǎn)。

4.4.2.1.調(diào)查示例圖

4.4.2.2.調(diào)查應(yīng)考慮以下要點(diǎn)

4.4.2.2.1. 微生物檢測中使用的樣品的完整性。

4.4.2.2.2. 進(jìn)行測試的微生物檢測人員的教育背景、技能和經(jīng)驗(yàn)。

4.4.2.2.3. 與微生物檢測人員相關(guān)的測試、環(huán)境和人員監(jiān)測歷史。

4.4.2.2.4. 用于測試的設(shè)備、用品、介質(zhì)、稀釋劑和試劑的適用性。

4.4.2.2.5. 環(huán)境控制，包括微生物檢測設(shè)施，層流罩，隔離器，和與測試相關(guān)的個(gè)人防護(hù)用品。

4.4.2.2.6. 培養(yǎng)皿菌落數(shù)讀取，微生物液體培養(yǎng)基渾濁確認(rèn)，數(shù)據(jù)記錄，計(jì)算準(zhǔn)確性，審查和報(bào)告結(jié)果。

4.4.2.2.7. 涉及偏差的分離株的微生物鑒定。

4.4.2.3.無菌檢查試驗(yàn)調(diào)查

4.4.2.3.1. 只有符合下列至少一個(gè)條件時(shí)方可認(rèn)為試驗(yàn)無效：

(1) 無菌檢查試驗(yàn)所用的設(shè)備及環(huán)境的微生物監(jiān)控結(jié)果不符合無菌檢查法的要求。

(2) 回顧無菌試驗(yàn)過程，發(fā)現(xiàn)有可能引起微生物污染的因素。

(3) 在陰性對(duì)照中觀察到微生物生長。

(4) 供試品管中生長的微生物經(jīng)鑒定后，確證是因無菌試驗(yàn)中所使用的物品和（或）無菌操作技術(shù)不當(dāng)引起的。

試驗(yàn)若經(jīng)評(píng)估確認(rèn)無效后，應(yīng)重試。重試時(shí)，重新取同量供試品，依法檢查，若無菌生長，判供試品符合規(guī)定；若有菌生長，判供試品不符合規(guī)定。

4.4.2.3.2. 無菌檢查試驗(yàn)無效時(shí)的建議的糾正預(yù)防措施：

?無菌試驗(yàn)設(shè)施的微生物監(jiān)測數(shù)據(jù)不符合無菌檢查法的要求：

建立文件化的質(zhì)量部/技術(shù)部程序，以確保所使用的培養(yǎng)基、稀釋劑、材料和設(shè)備的無菌性和促進(jìn)生長的能力。

使用殺孢子劑定期、持續(xù)對(duì)有關(guān)區(qū)域進(jìn)行衛(wèi)生消毒。

對(duì)人員進(jìn)行無菌技術(shù)和操作操作方面的 GMP 再培訓(xùn)。

建立或加強(qiáng)潔凈室設(shè)備的定期預(yù)防性維護(hù)和核查程序，增加人員和關(guān)鍵區(qū)域的微生物監(jiān)測，以確保環(huán)境控制。

驗(yàn)證和監(jiān)控用于滅菌的無菌室設(shè)備(每個(gè)滅菌周期的數(shù)據(jù))的滅菌程序。

?對(duì)測試期間使用的測試規(guī)程的回顧：

為培養(yǎng)基的準(zhǔn)備、儲(chǔ)存、庫存控制和過期培養(yǎng)基的銷毀建立適當(dāng)?shù)臉?biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程。

要求兩名操作人員進(jìn)行無菌測試，以便于在優(yōu)化無菌處理和操作核實(shí)的同時(shí)盡量減少疲勞。

為所有的繼代培養(yǎng)活動(dòng)建立一個(gè)單獨(dú)的指定區(qū)域，并準(zhǔn)備一個(gè) SOP 來清潔和監(jiān)控這個(gè)區(qū)域。

?陰性對(duì)照中發(fā)現(xiàn)微生物生長

當(dāng)陰性對(duì)照被發(fā)現(xiàn)為陽性時(shí)，需要另一個(gè)人，例如，微生物主管，觀察確認(rèn)污染。

檢查測試容器的密封完整性，因?yàn)樗赡茉谥圃臁?chǔ)存或運(yùn)輸?shù)轿⑸飳?shí)驗(yàn)室的過程中被損壞。

檢查測試過程中使用的組件滅菌、物料轉(zhuǎn)移、環(huán)境控制和無菌技術(shù)。

?在確定了從試驗(yàn)中分離出來的微生物的特性后，可以明確地將這種微生物(或這些微生物)的生長歸因于在進(jìn)行無菌試驗(yàn)過程中所使用的材料和或技術(shù)方面的缺陷。

在將試驗(yàn)失敗的菌株與人員、EM、過往無菌和培養(yǎng)基模擬灌裝失敗的菌株進(jìn)行比較時(shí)，使用相同或等效的鑒定技術(shù)來確認(rèn)對(duì)試驗(yàn)失敗菌株的識(shí)別。

4.4.3. 階段結(jié)論及下一個(gè)步驟

4.4.3.1.在調(diào)查過程中發(fā)現(xiàn)的事件可能是導(dǎo)致偏差的原因，并提供了一個(gè)直接導(dǎo)致偏差的

明確的根本原因。在這些情況下，測試可能被認(rèn)為是無效的。在試驗(yàn)無效的情況下，階段調(diào)查將在未進(jìn)入第二階段制造調(diào)查的情況下結(jié)束。

4.4.3.2.雖然調(diào)查可能揭示了問題，但可能沒有足夠的證據(jù)將調(diào)查結(jié)果與偏差直接聯(lián)系起來。例如，如果在檢測期間進(jìn)行的環(huán)境監(jiān)測檢查顯示存在微生物，但這些微生物與樣品中的污染是不同的屬和種，那么環(huán)境結(jié)果可能會(huì)對(duì)樣品產(chǎn)生懷疑，但不會(huì)使原來的結(jié)果無效。因此，實(shí)驗(yàn)室調(diào)查將被認(rèn)為是非結(jié)論性的，沒有提供足夠的證據(jù)來推翻結(jié)果，該結(jié)果被認(rèn)為是有效的。

4.4.3.3. 調(diào)查結(jié)果沒有顯示任何測試失敗的證據(jù)。換句話說，可以清楚地證明，所有的程序都被遵循了，分析人員有適當(dāng)?shù)馁Y格來執(zhí)行測試，所有的材料、設(shè)備和測試環(huán)境都被認(rèn)為是適合測試的。報(bào)告數(shù)據(jù)的計(jì)算和所有最終結(jié)果是正確的，并得到驗(yàn)證。因此，偏差被確認(rèn)并被認(rèn)為是有效的。

4.4.4. 復(fù)檢及重新取樣

4.4.4.1.無菌檢查

調(diào)查結(jié)果證實(shí)是實(shí)驗(yàn)室原因，則可以重新取樣檢驗(yàn)，若非實(shí)驗(yàn)室原因，則以一次檢驗(yàn)結(jié)果作為最終的結(jié)果報(bào)告，不允許復(fù)檢。

4.4.4.2.微生物限度檢查

控制菌或其他致病菌的調(diào)查結(jié)果證實(shí)是實(shí)驗(yàn)室原因，則可以重新取樣檢驗(yàn)，若非實(shí)驗(yàn)室原因，則以一次檢驗(yàn)結(jié)果作為最終的結(jié)果報(bào)告，不允許復(fù)檢。

需氧菌、霉菌及酵母菌的調(diào)查結(jié)果證實(shí)是實(shí)驗(yàn)室原因，則可以重新取樣檢驗(yàn)，若非實(shí)驗(yàn)室原因，則從同一批樣品中隨機(jī)抽樣，獨(dú)立復(fù)試兩次，以三次檢驗(yàn)結(jié)果的平均值作為最終的結(jié)果報(bào)告。

4.4.4.3.內(nèi)毒素檢查

一次檢驗(yàn)結(jié)果不合格，復(fù)測后不合格，換人復(fù)測后還是不合格，調(diào)查結(jié)果證實(shí)是實(shí)驗(yàn)室原因，則可以重新取樣檢驗(yàn)，若非實(shí)驗(yàn)室原因，則由第一次檢驗(yàn)結(jié)果作為最終的結(jié)果報(bào)告，不再復(fù)檢。

4.4.4.4.工藝用水

工藝用水在檢驗(yàn)中出現(xiàn)的MDD，無論最終的調(diào)查結(jié)果是否由實(shí)驗(yàn)室引起的，都不進(jìn)行重新取樣。因?yàn)橹匦氯記]有代表意義，如是實(shí)驗(yàn)室引起的，對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量沒有風(fēng)險(xiǎn)。如是水系統(tǒng)引發(fā)的，需評(píng)價(jià)對(duì)產(chǎn)品的風(fēng)險(xiǎn)，并立即通知相關(guān)部門對(duì)水系統(tǒng)進(jìn)行處理。

4.5. 微生物異常數(shù)據(jù)和偏差調(diào)查后，執(zhí)行《不符合項(xiàng)控制程序》及《糾正與預(yù)防措施程序》

4.5.1. 糾正行動(dòng)必須針對(duì)根本原因

4.5.2. 使用適當(dāng)?shù)姆椒ǎ钥s小可能采取的糾正行動(dòng)的范圍，從而選擇最好的解決方案。

4.5.3. 每個(gè)人員的任務(wù)、交付的文件、時(shí)間限度、職能和職責(zé)都應(yīng)有文件記錄。

4.5.4. 進(jìn)展報(bào)告應(yīng)及時(shí)地遞交給受影響部門的部門經(jīng)理以及質(zhì)量部，以確保能夠滿足制定的時(shí)間限度，并及時(shí)地解決發(fā)現(xiàn)的問題。

4.5.5. 如果超出時(shí)間規(guī)定，應(yīng)對(duì)延遲的理由做出書面記錄，并上交給質(zhì)量部以進(jìn)行審核并獲得其同意。

4.6.評(píng)價(jià)有效性

4.6.1. 審核制定的糾正與預(yù)防措施，以確定MDD是否如預(yù)計(jì)的減少了或消除了。

4.6.2. 使用內(nèi)部審計(jì)規(guī)程，以確定是否消除了問題。

4.6.3. 進(jìn)行產(chǎn)品年度回顧時(shí)檢查相關(guān)的文件，以確定糾正行動(dòng)是否有效地解決了問題。

4.6.4. 根據(jù)變更，尋找未預(yù)料到的不良后果。

4.7. 微生物檢驗(yàn)出現(xiàn)異常時(shí)，進(jìn)行調(diào)查時(shí)需要根據(jù)內(nèi)容填寫《微生物檢驗(yàn)調(diào)查報(bào)告清單》和《內(nèi)毒素檢驗(yàn)調(diào)查報(bào)告清單》，作為MDD的調(diào)查附件。

4.7.1. 環(huán)境監(jiān)測出現(xiàn)MDD時(shí)，進(jìn)行調(diào)查時(shí)需要填寫《環(huán)境監(jiān)測調(diào)查報(bào)告清單》，作為MDD調(diào)查附件。

5. 參考文件

6.1《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》                           

6.2《PDA TR88 制藥行業(yè)微生物數(shù)據(jù)偏差調(diào)查》  

6.3《中國藥典四部》

6. 附件

附錄一微生物實(shí)驗(yàn)室MDD流程圖

7. 關(guān)聯(lián)記錄

7.1微生物檢驗(yàn)調(diào)查報(bào)告清單                       

7.2內(nèi)毒素檢驗(yàn)調(diào)查報(bào)告清單                        

7.3環(huán)境監(jiān)測調(diào)查報(bào)告清單                          

附件1.   微生物實(shí)驗(yàn)室MDD流程圖     

7.1微生物檢驗(yàn)調(diào)查報(bào)告清單        

7.2內(nèi)毒素檢驗(yàn)調(diào)查報(bào)告清單  

7.3環(huán)境監(jiān)測調(diào)查報(bào)告清單