脂類染色
一、脂類概述
脂類物質(zhì)在人體中占有相當(dāng)大的部分，通常它們?cè)谌梭w內(nèi)以兩種形式存在，第一種為脂肪，主要為中性脂肪，儲(chǔ)存的部位如皮下，大網(wǎng)膜，肌間腎周圍組織等部位，另外一種為結(jié)構(gòu)脂肪，如磷脂，膽固醇等它們與蛋白，糖類結(jié)合在一起存在于細(xì)胞內(nèi)，構(gòu)成細(xì)胞的組成成分。
1、單純脂質(zhì)：由脂肪酸各醇化合的酯，如中性脂肪，油及蠟等，蘇丹染料可染為黑色或紅色。
2、復(fù)合物質(zhì)，脂肪酸的酯經(jīng)水解后生成醇類，脂肪酸，磷酸和含氮的堿基等，復(fù)合脂質(zhì)分為磷脂和糖脂。
①磷脂：卵磷脂，腦磷脂和神經(jīng)鞘磷脂。蘇丹黑染色為陽性，PAS反應(yīng)為陰性。
②糖脂，PAS反應(yīng)呈陽性。
③衍生脂質(zhì)：指尚具有脂質(zhì)性質(zhì)的單純脂質(zhì)或復(fù)合脂的水產(chǎn)物，屬于這類的有脂肪酸和固醇類。
脂肪酸：硫酸耐爾藍(lán)陽性，PAS陰性。
膽固醇及其酯：Schultz試驗(yàn)陽性。
組織化學(xué)的脂類物質(zhì)：
1、中性物質(zhì)，如甘油三酯，膽固醇及其酯，類固醇和某些糖酯。
2、酸性脂質(zhì)，脂肪酸，磷脂。
二、蘇丹III IV聯(lián)合法（combined SudanIII IV method for lipids）
1、脂類組織的固定及固定液
脂類組織的固定特別要注意的問題，就是不要選擇含酒精的固定液，因?yàn)榫凭砂阎愇镔|(zhì)溶解，因此，用于脂類物質(zhì)的首選固定液是甲醛，它可較好地保存脂類物質(zhì)。
2、試劑的配制：蘇丹III0.2g，70%酒精50ml；蘇丹IV0.5g丙酮50ml。
3、操作步驟：
（1）用經(jīng)過甲醛固定過的組織作冰凍切片，厚約10-15um，切完后放入蒸餾水中，染色前放入50%-70%酒精洗。
（2）入蘇丹III IV染液染5分鐘，
（3）70%酒精分化，
（4）水洗，
（5）蘇木素淺染細(xì)胞核，
（6）水洗，必要時(shí)分化，
（7）藍(lán)化，如為漂浮染色，此時(shí)應(yīng)將切片附貼于載片，
（8）甘油明膠封固。
結(jié)果：脂類物質(zhì)呈現(xiàn)橘紅色或鮮紅，核藍(lán)色。
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