水產(chǎn)品中五氯苯酚及其鈉鹽殘留量的測(cè)定——?dú)庀嗌V法
1范圍
本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了水產(chǎn)品中五氯苯酚及其鈉鹽殘留量的氣相色譜測(cè)定方法。
本標(biāo)準(zhǔn)適用于水產(chǎn)品中五氯苯酚及其鈉鹽殘留量的測(cè)定。
2規(guī)范性引用文件
下列文件中的條款通過本標(biāo)準(zhǔn)的引用而成為本標(biāo)準(zhǔn)的條款。凡是注日期的引用文件,其隨后所有的修改單(不包括勘誤的內(nèi)容)或修訂版均不適用于本標(biāo)準(zhǔn)，然而，鼓勵(lì)根據(jù)本標(biāo)準(zhǔn)達(dá)成協(xié)議的各方研究是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)。
GB/T 6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法
3原理
酸性條件下將樣品中的五氯酚鈉轉(zhuǎn)化為五氯苯酚，用正己烷萃取，碳酸鉀溶液反萃取，加乙酸酊與五氯酚鹽反應(yīng)生成五氯苯乙酸酯，用配有電子捕獲檢測(cè)器的氣相色譜儀測(cè)定,外標(biāo)法定量。
4試劑
除另有規(guī)定外，所用試劑均為分析純，試驗(yàn)用水應(yīng)符合GB/T 6682 一級(jí)水指標(biāo)。
4.1正己烷:色譜純。
4.2乙酸酐。
4.3無水硫酸鈉：650°C灼燒4 h,儲(chǔ)于干燥器中備用。
4.4碳酸鉀溶液［c(K2CO3)=0. 1 mol/L］：取13. 8 g無水碳酸鉀溶于水中,加水至1 000 mL。
4.5 50%硫酸溶液:濃硫酸緩慢加入等體積蒸儲(chǔ)水中,配制成50%硫酸溶液。
4.6五氯苯酚:標(biāo)準(zhǔn)品，純度 ≥99%。
4.7五氯苯酚標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液:準(zhǔn)確稱取0. 050 0 g五氯苯酚標(biāo)準(zhǔn)品,用碳酸鉀溶液定容至100 mL,配制成濃度為500 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。4°C保存,有效使用期為3個(gè)月。
4.8五氯苯酚標(biāo)準(zhǔn)工作液:以碳酸鉀溶液稀釋標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液,配制成0. 3 μg/L、 1μg/L、5 μg/L、10μg/L、 50μg/L、100μg/L系列濃度的標(biāo)準(zhǔn)工作液。
5儀器
5.1 氣相色譜儀:配有電子捕獲檢測(cè)器。
5.2 微量注射器：10 μL。
5.3 離心機(jī)：4 000 r/min。
5.4 勻漿機(jī)。
5.5 渦旋混合器。
5.6 分析天平:感量0.000 1 g。
5.7 25 mL、50 mL具磨口塞離心管。
5. 8 10 mL離心管。
6測(cè)定步驟
6.1樣品預(yù)處理
6.1.1制樣
取水產(chǎn)品可食部分，切成不大于0. 5 cm×0. 5 cm×0. 5 cm的小塊，打成肉糜混勻備用。
6.1.2提取
稱取約1g（精確至0. 01 g）的試樣于50 mL具塞離心管中，加入8 mL 50%硫酸溶液,用勻漿機(jī)分散成懸濁液。80°C水浴30 min。冷卻后加10 mL正己烷，渦旋混勻2 min,4 000 r/min離心5 min,抽取上層正己烷置于另一 50 mL具塞離心管中，再加10 mL正己烷抽提一次,合并提取液。
6.1.3凈化
在提取液中加入4 mL碳酸鉀溶液，渦旋混勻2 min,4 000 r/min離心3 min,吸取碳酸鉀提取液于25 mL具塞離心管，再加4 mL碳酸鉀溶液重復(fù)提取一次,合并碳酸鉀提取液。
6.1.4衍生
碳酸鉀提取液中加入0.2 mL乙酸酐，振搖3 min并不斷放氣，加2. 5 mL正己烷萃取,正己烷萃取液 移于5 mL容量瓶中，再加2.0 mL正己烷重復(fù)萃取一次，合并正己烷萃取液，定容至5 mL,再加入約2 g 無水硫酸鈉脫水，溶液移入進(jìn)樣瓶，待測(cè)。
6.2標(biāo)準(zhǔn)工作液的衍生
準(zhǔn)確吸取0. 3μg/L、1 μg/L、5 μg/L、10 μg/L、50 μg/L,100μg/L的標(biāo)準(zhǔn)工作液各5. 0 mL,分別置于 25 mL具塞試管中，加3 mL碳酸鉀溶液，按6.1.4步驟操作。
6.3測(cè)定
6.3.1氣相色譜條件
色譜柱：毛細(xì)管柱，填料：35%聚二苯基二甲基硅氧烷，[（35% Phenyl） methylpolysiloxane,如DB 35MS],規(guī)格：30 m×0. 25 mm×0. 25μm,或相當(dāng)者。
進(jìn)樣口溫度：250°C。
檢測(cè)器溫度：300°C。
柱溫:起始溫度140°C，保持2 min；以10°C/min升溫至200°C,保持7 min；升溫至260°C，保持3 mino 載氣:氮?dú)?/span>，純度≥99.999%,流量1. 2 mL/min,線速度29 cm/s；或氨氣，純度≥99.999%,流量 1. 5 mL/min,線速度 38 cm/s。
尾吹氣:氮?dú)?60. 0 mL/min。
進(jìn)樣量：1 μL。
進(jìn)樣方式:不分流進(jìn)樣。
吹掃放空流量：60. 0 mL/min，吹掃放空時(shí)間：0. 75 min。
6.3.2標(biāo)準(zhǔn)曲線
衍生后的標(biāo)準(zhǔn)工作液進(jìn)樣，以峰面積為縱坐標(biāo)、以對(duì)應(yīng)五氯苯酚濃度為橫坐標(biāo),進(jìn)行一元線性回歸峰面積-濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線方程。
6.3.3樣品測(cè)定
樣品提取液進(jìn)樣，記錄峰面積，從標(biāo)準(zhǔn)曲線方程計(jì)算樣品待測(cè)溶液中五氯苯酚濃度。樣品待測(cè)溶液中五氯苯酚濃度應(yīng)在標(biāo)準(zhǔn)曲線濃度范圍內(nèi)。五氯苯乙酸酯的氣相色譜圖參見附錄A。
6.4計(jì)算
試樣中的五氯苯酚的含量按照式（1）計(jì)算。
式中：
X —樣品中五氯苯酚及其鈉鹽含量（以五氯苯酚計(jì)），單位為微克每千克（μg/kg）；
c —由標(biāo)準(zhǔn)曲線方程計(jì)算所得樣品提取溶液中五氯苯酚濃度，單位為微克每升(μg/L)；
V——樣品提取溶液體積，單位為毫升(mL)；
m——樣品質(zhì)量，單位為克(g)。
7線性范圍、檢測(cè)限、回收率、精密度
7. 1線性范圍
0. 3μg/L?100 μg/L。
7.2檢出限
本方法最低檢出限為1. 0 μg/kg。
7.3回收率
在樣品中添加2 μg/kg~10 μg/kg五氯苯酚時(shí)，回收率為70%?110%。
7.4重復(fù)性
樣品中五氯苯酚濃度＞10 μg/kg時(shí),重復(fù)性相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差≤10%。
樣品中五氯苯酚濃度≤10 μg/kg時(shí),重復(fù)性相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差≤20%。
文章來源：《水產(chǎn)品獸藥殘留限量及監(jiān)測(cè)方法查詢手冊(cè)》
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