卵磷脂的提取純化、鑒定的原理及方法
卵磷脂具有極大的醫(yī)藥保健作用，很多研究者都在尋找高純度卵磷脂的梯度洗脫層析的溶劑萃取工藝。本文主要總結(jié)了卵磷脂的提取純化、鑒定的原理以及方法步驟。
一、目的：
1.加深了解磷脂類物質(zhì)的結(jié)構(gòu)和性質(zhì).
2.掌握卵磷脂的提取鑒定的原理和方法.
二、實(shí)驗(yàn)原理：
磷脂是生物體組織細(xì)胞的重要成分,主要存在于大豆等植物 組織以及動(dòng)物的肝、腦、脾、心等組織中,尤其在蛋黃中含量較多(10%左右).卵磷脂和腦磷脂均溶于乙醚 而不溶于丙酮,利用此性質(zhì)可將其與中性脂肪分離開;此外,卵磷脂能溶于乙醇而腦磷脂不溶,利用此性質(zhì)又可將卵磷脂和腦磷脂分離.
新提取的卵磷脂為 白色,當(dāng)與空氣接觸后,其所含不飽和脂肪酸會(huì)被氧化而使卵磷脂呈黃褐色.卵磷脂被堿水解后可分解為脂肪酸鹽、甘油、膽堿和磷酸鹽.甘油與硫酸氫鉀共熱,可 生成具有特殊臭味的丙烯醛;磷酸鹽在酸性條件下與鉬酸銨作用,生成黃色的磷鉬酸沉淀;膽堿在堿的進(jìn)一步作用下生成無色且具有氨和魚腥氣味的三甲胺.這樣通 過對(duì)分解產(chǎn)物的檢驗(yàn)可以對(duì)卵磷脂進(jìn)行鑒定.
三、儀器和試劑：
儀器：
小燒杯、試管.
試劑：
1. 雞蛋黃
2. 紅色石蕊試紙
3. 95%乙醇
4. 10%氫氧化鈉溶液
5. 鉬酸銨試劑將6g 鉬酸銨溶于15mL 蒸餾水中,加入5mL 濃氨水,另外將24mL 濃硝酸溶于46mL的蒸餾水中,兩者混合靜置一天后再用.
6. 丙酮
7. 乙醚
8. 3%溴的四氯化碳溶液
9. 硫酸氫鉀
四、操作步驟：
(一)卵磷脂的提取：
稱取約10g 蛋黃于小燒杯中,加入溫?zé)岬?5%乙醇30mL,邊加邊攪拌均勻,冷卻后過濾.如濾液仍然混濁,可重新過濾直至完全透明.將濾液置于蒸發(fā)皿內(nèi),水浴鍋中蒸干,所得干物即為卵磷脂.
(二)卵磷脂的溶解性：
取干燥試管,加入少許卵磷脂,再加入5mL 乙醚,用玻棒攪動(dòng)使卵磷脂溶解,逐滴加入丙酮3～5mL,觀察實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象.
(三)卵磷脂的鑒定：
1、三甲胺的檢驗(yàn)：
取干燥試管一支,加入少量提取的卵磷脂以及2～5mL 氫氧化鈉溶液,放入水浴中加熱15min,
在管口放一片紅色石蕊試紙,觀察顏色有無變化,并嗅其氣味.將加熱過的溶液過濾,濾液供下面檢驗(yàn).
2、不飽和性檢驗(yàn)：
取干凈試管一支,加入10滴上述濾液,再加入1～2滴3% 溴的四氯化碳溶液,振搖試管,觀察有何現(xiàn)象產(chǎn)生.
3、磷酸的檢驗(yàn)：
取干凈試管一支,加入10滴上述濾液和5～10滴95%乙醇溶液,然后再加入5~10滴鉬酸銨試劑,觀察現(xiàn)象;最后將試管放入熱水浴中加熱5～10min,觀察有何變化.
4、甘油的檢驗(yàn)：
取干凈試管一支,加入少許卵磷脂和0.2g 硫酸氫鉀,用試管夾夾住并先在小火上略微加熱,使卵磷脂和硫酸氫鉀混熔,然后再集中加熱,待有水蒸氣放出時(shí),嗅有何氣味產(chǎn)生.
卵磷脂是一種重要的生理物質(zhì)，又是一種天然的表面活性劑，具有極大的醫(yī)學(xué)價(jià)值。然而目前提取高純度卵磷脂技術(shù)還是一篇空白，因此開發(fā)卵磷脂提取純化工藝迫在眉睫。
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