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染色方法的性能驗證
發布日期:2025-06-17 15:48:59


 

染色方法的性能驗證


  • 染色方法的性能驗證是細菌、真菌形態學檢查性能驗證的一種,當實驗室的染色方法發生變更時,如更換廠家或銘牌時,在使用前應當進行染色方法的性能驗證。

  • 驗證菌株

革蘭染色、抗酸染色(萋尼法、熒光法)、弱抗酸染色、墨汁染色、真菌鈣熒光白染色、乳酸酚棉染色和六胺銀染色等是實驗室常用的幾種細菌、真菌形態學顯微鏡檢查項目。這些常用染色方法的性能驗證所使用的菌種和性能特點如下:
  • 革蘭染色

  • 金黃色葡萄球菌:革蘭染色陽性,呈紫藍色

  • 大腸埃希菌:革蘭染色陰性,呈粉紅色

  • 抗酸染色(萋尼法、熒光法)

  • 分枝桿菌屬,一般采用快生長分枝桿菌或滅活后的結核分枝桿菌:萋尼法抗酸染色陽性,呈紅色;熒光法抗酸染色陽性,呈亮黃色

  • 大腸埃希菌:萋尼法抗酸染色陰性,呈藍色;熒光法抗酸染色陰性,無顏色

  • 弱抗酸染色

  • 諾卡菌屬:弱抗酸染色陽性,呈紅色

  • 大腸埃希菌:弱抗酸陰性,呈藍色

  • 墨汁染色

  • 新型隱球菌(腦心浸液培養物):黑色背景下可見酵母樣孢子,周圍有明亮的莢膜

  • 白念球菌:黑色背景下未見明亮的莢膜

  • 真菌鈣熒光白染色

  • 白念珠菌真菌的菌絲及孢子均呈亮藍色,結構清晰明顯

  • 大腸埃希菌呈弱藍色熒光

  • 乳酸酚棉染色

  • 絲狀真菌(如曲霉菌屬)真菌染成藍色,孢子及菌絲結構清晰

  • 六胺銀染色

  • 肺孢子菌六胺銀染色既往陽性標本或白念珠菌肺孢子菌:包囊壁應呈棕黑色,圓形或橢圓形真菌孢子和菌絲染成棕黑色


  • 除了以上常用染色方式性能驗證涉及的菌種,還可以使用標準菌株、QC菌株或經過明確鑒定(如質譜或測序)的臨床菌株。另外,每項染色的性能驗證應該選擇至少5株菌,包括不同染色性能和形態特征的菌株。

  • 對于菌株的要求,驗證用的細菌、真菌或分岐桿菌等應在相應的培養基上復蘇、傳代后,使用對數生長期的純菌落。

注:詳見《WS/T 807-2022--臨床微生物培養、鑒定和藥敏檢測系統的性能驗證》