單糖組成分析
【實驗原理】
多糖在濃硫酸中保溫一定時間可完全水解為單糖，通過紙層析分離，特定 試劑 顯色后與已知糖的標準混合物作對比，可以鑒定多糖水解產物中單糖的組成。
【實驗材料】
1. 實驗器材
水解管；濾紙；玻璃毛細管；層析缸；噴霧器。
2. 實驗 試劑
⑴ 標準糖溶液: 稱取一定量的半乳糖、葡萄糖、甘露糖、阿拉伯糖，用 蒸餾 水溶解，得標準糖混合溶液(每種糖的點樣量為20微克~30微克)。
⑵ 展層劑： 正丁醇：乙酸：水=4：l：5 (上層)。
⑶ 顯色劑：苯胺-鄰苯二甲酸-正丁醇飽和水溶液(鄰苯二甲酸1.6g溶于水飽和的正丁醇100 ml，加苯胺0.93g（相當于0.9 ml）。
⑷ BaCO3；1mol/L硫酸。
【實驗操作】
l．完全酸水解：
稱取20 mg多糖樣品，加入1mol/L H 2 SO 4 2ml；封管，l00℃水解8小時，然后加入BaCO 3 中和，定量 濾紙 過濾，濾液留作分析。
2．紙層析：
將層析 濾紙 剪成7cm×40cm的紙條，距層析濾紙一端2cm處畫一橫線作為點樣線,在點樣線上畫兩個點分別作為標準糖溶液和多糖水解液的點樣位置。用玻璃毛細管點樣，斑點盡可能小，而且每點一滴，待點樣點干燥后，在同一位置再點第二滴。然后將濾紙條懸掛于層析缸中進行層析，展層時間約為36小時。
3．顯色：
將濾紙取出，自然干燥，噴上苯胺-鄰苯二甲酸-正丁醇飽和水溶液，100℃條件下15分鐘即可顯色。標準單糖混合物色斑在濾紙上由下而上的順序是：半乳糖-葡萄糖-甘露糖-阿拉伯糖。與標準單糖混合物色斑比較，即可判斷多糖樣品的單糖組成
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