原位雜交與熒光原位雜交
一、原位雜交 ( In Situ Hybridization,ISH)
是用標(biāo)記的核酸探針，使用非放射檢測(cè)系統(tǒng)或放射自顯影系統(tǒng)，在組織切片、細(xì)胞涂片及染色體制片上等對(duì)核酸進(jìn)行定性、定位和相對(duì)定量研究的一種分子生物學(xué)方法，具有靈敏、特異、直觀等優(yōu)點(diǎn)。已逐漸成為分子生物學(xué)和分子病理學(xué)的常見(jiàn)技術(shù)之一，廣泛應(yīng)用于腫瘤生物學(xué)、血液病理學(xué)、遺傳、微生物學(xué)、細(xì)胞和分子生物學(xué)、神經(jīng)內(nèi)分泌學(xué)、免疫學(xué) 等領(lǐng)域及治療評(píng)估和預(yù)后判斷等研究中。
菌落原位分子 雜交：是指將轉(zhuǎn)化或感染后的菌落印影在濾膜上，用堿裂解，中和后洗凈烘干，再用目的基因的放射性DNA或mRNA作探針(Probe)進(jìn)行雜交放射自顯影，凡出現(xiàn)黑點(diǎn)的菌落即應(yīng)中選。
二、熒光原位雜交(Fluorescence in situ Hybridization)
是原位雜交技術(shù)大家族中的一員，因其所用探針被熒光物質(zhì)標(biāo)記（間接或直接）而得名，該方法在80年代末被發(fā)明，現(xiàn)已從實(shí)驗(yàn)室逐步進(jìn)入臨床診斷領(lǐng)域。基本原理是熒光標(biāo)記的核酸探針在變性后與已變性的靶核酸在退火溫度下復(fù)性；通過(guò)工業(yè)區(qū)光顯微鏡觀察熒光信號(hào)可在不改變被分析對(duì)象（即維持其原位）的前提下對(duì)靶核酸進(jìn)行分析。DNA熒光標(biāo)記探針是其中最常用的一類核酸探針。利用此探針可對(duì)組織、細(xì)胞或染色體中的DNA進(jìn)行染色體及基因水平的分析。在該領(lǐng)域中產(chǎn)品頗具名氣的公司之一為美國(guó)Vysis公司，它是一家專業(yè)生產(chǎn)FISH產(chǎn)品的公司，其產(chǎn)品涉及到熒光標(biāo)記探針，雜交，檢測(cè)用試劑，雜交用儀器，觀察分析用儀器用及軟件等，幾乎涵蓋FISH技術(shù)所需的所有試劑和設(shè)備。
熒光標(biāo)記控針不對(duì)環(huán)境構(gòu)成污染，靈敏度能得到保障，可進(jìn)行多色觀察分析，因而可同時(shí)使用多個(gè)探針，縮短因單個(gè)探針?lè)珠_(kāi)使用導(dǎo)致的周期過(guò)程和技術(shù)障礙。Vysis公司的熒光標(biāo)記探針均為直接法標(biāo)記，可省去信號(hào)放大系統(tǒng)，減少試劑投入且保障更大程度的特異性，同時(shí)也有信號(hào)清晰，背景低及方法簡(jiǎn)單易于操作等優(yōu)點(diǎn)。
北京天優(yōu)?？瞪锟萍加邢薰?/span>
官網(wǎng)：http://www.gzs9.cn/
服務(wù)熱線：400-860-6160
聯(lián)系電話/微信：13718308763
QQ:2136615612 3317607072
E-mail：Tianyoubzwz@163.com
