瓊脂和瓊脂糖
做生物實驗的人對瓊脂和瓊脂糖一定都不會陌生。不過要讓你說出它們兩者的區(qū)別,我想不少人都會支支吾吾。反正不一樣唄,培養(yǎng)基用的是瓊脂粉,電泳用的是瓊脂糖。具體有啥學(xué)問,聽我一一道來。
先來說說瓊脂,它的英文名為agar。這個詞來源于馬來語的agar-agar,意思是膠狀物。中國人亦稱為洋菜或凍粉。日本人稱之為寒天(kanten),因為它在冬天收獲。臺灣人叫它菜燕,和燕窩的質(zhì)感差不多。韓國人的叫法是??(不知道啥意思)。
瓊脂作為一種獨(dú)特的食品在我國已經(jīng)有悠久的歷史。它是從大型海洋藻類石花菜、紫菜、江籬等提取分離制成的,廣泛應(yīng)用于食品和生化等行業(yè)。我們常吃的果凍、冰淇淋、糕點(diǎn)、軟糖、罐頭、八寶粥中都含有瓊脂。我國的山東、福建、廣東、海南等擁有優(yōu)越的海洋資源和氣候條件,適宜大型海洋藻類的生長,是生產(chǎn)瓊脂的主要地區(qū),產(chǎn)品遠(yuǎn)銷世界各地。
瓊脂是由瓊脂糖(agarose)和瓊脂果膠(agaropectin)組成的。瓊脂糖是線性的多聚物,基本結(jié)構(gòu)是1,3連結(jié)的β-D-半乳呋喃糖和1,4連結(jié)的3,6-脫水α-L-半乳呋喃糖。瓊脂果膠是由許多更小的分子組成的異質(zhì)混合物。它們的結(jié)構(gòu)相似,但帶硫酸根和羧基組分,凝膠能力差。
瓊脂糖在水中一般加熱到90℃以上溶解,溫度下降到35-40℃時形成良好的半固體狀的凝膠,這是它具有多種用途的主要特征和基礎(chǔ)。瓊脂糖凝膠性能通常用凝膠強(qiáng)度表示。強(qiáng)度越高,凝膠性能越好。質(zhì)量較好的瓊脂糖強(qiáng)度通常在1200克/cm2以上(1%膠濃度)。瓊脂糖的凝膠性是由存在的氫鍵所致,凡是能破壞氫鍵的因素都能導(dǎo)致凝膠性的破壞。
瓊脂糖具有親水性,并幾乎完全不存在帶電基團(tuán),對敏感的生物大分子極少引起變性和吸附,是理想的惰性載體。在瓊脂糖制備過程中需要把瓊脂果膠盡量去除,否則瓊脂糖有可能存在極微量硫酸根和丙酮酸取代電離基團(tuán),就會造成電內(nèi)滲(EEO),電內(nèi)滲對質(zhì)點(diǎn)的移動產(chǎn)生影響。質(zhì)量較好的瓊脂糖硫酸根含量比較低,通常在0.2%以下,電內(nèi)滲比較小,通常在0.13以下。這也就是瓊脂糖比瓊脂貴那么多的原因了。
1937年荒木第一次從瓊脂中分離出瓊脂糖,但直到1961年Hjertin首先發(fā)現(xiàn)了瓊脂糖優(yōu)異的使用性能后才引起了越來越多的關(guān)注,并開始工業(yè)生產(chǎn)。目前,瓊脂糖廣泛應(yīng)用于臨床化驗、生化分析和生物大分子物質(zhì)的分離等領(lǐng)域。
現(xiàn)在實驗室中最常用的瓊脂糖應(yīng)該是西班牙biowest出產(chǎn)的。
產(chǎn)品特性:
◆透明度好:溶解快,膠液清澈透明
◆高強(qiáng)度:保證凝膠的強(qiáng)度與彈性,即使是低濃度的凝膠也不易發(fā)生破碎。
◆低電內(nèi)滲:減少對電泳質(zhì)遷物遷移與分離的影響。
◆極低的背景:沒有其它熒光物質(zhì)干擾,泳帶與背景黑白分明,拍攝的圖片效果好。
◆沒有核酸酶和蛋白酶。
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