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DNA重組技術中最常用的工具酶
發(fā)布日期:2022-08-25 17:04:35


DNA重組技術中最常用的工具酶


限制性核酸內(nèi)切酶 識別DNA特定序列,切斷DNA鏈


DNA聚合酶Ⅰ 或其大片段(Klenow)


①缺口平移制作標記DNA探針 


②合成cDNA的第二鏈


③填補雙鏈DNA3’凹端④DNA序列分析


耐熱DNA聚合酶(Taq DNA聚合酶等) 聚合酶鏈反應(
PCR


DNA連接酶 連接兩個DNA分子或片段


核苷酸激酶 催化多核苷酸5’羥基末端磷酸化,制備末端標記探針


末端轉移酶 在3’末端加入同質(zhì)多聚物尾


SI核酸酶,綠豆核酸酶 降解單鏈DNA或RNA,使雙鏈DNA突出端變?yōu)槠蕉?/span>


DNA端酶Ⅰ 降解DNA,在雙鏈DNA上產(chǎn)生隨機切口


RNA酶A 降解除RNA


磷酸酶 切除核酸末端磷酸基


核酸酶

核酸外切酶 (exonuclease):是從核酸的一端開始,一個接一個把核苷酸水解下來;


核酸內(nèi)切酶 (endonuclease):是從核酸鏈中間水解3’,5’磷酸二酯鍵,將核酸鏈切斷。


DNA限制性內(nèi)切酶 粘性末端配對重組


同裂酶 有一些來源不同的限制酶識別的是同樣的核苷酸靶子序列,這類酶稱為同裂酶。同裂酶產(chǎn)生同樣的切割,形成同樣的末端。


同尾酶 這一類的限制酶來源各異,識別的靶字序列也不相同,但產(chǎn)生相同的粘性末端。由同尾酶產(chǎn)生的DNA片段,是能夠通過其粘性末端之間的互補作用彼此連接起來的。




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