彈性蛋白酶活性測定
問：我要檢測痰中彈性蛋白酶的活力，買的是sigma的底物，在410nm處比色，請問最后酶活力用什么單位來表示呢？加完底物后，立即比色，我隔5分鐘就測定一次，一共測了一個(gè)小時(shí)。最后只得出了OD值，看相關(guān)書籍及各位戰(zhàn)友以前的帖子，發(fā)現(xiàn)需要?jiǎng)澇鰳?biāo)準(zhǔn)曲線，請各位高手指教，具體的測酶活力的具體步驟好嗎？要做哪些標(biāo)準(zhǔn)曲線呢？
答：您每5min進(jìn)行一次測定，我想目的應(yīng)該是對酶反應(yīng)時(shí)間進(jìn)行考察，從而得出彈性蛋白酶與底物完全反應(yīng)所需的時(shí)間，理論上應(yīng)該是以相同的量比的彈性蛋白酶（過量）與底物若干份，分別孵育不同的時(shí)間，再進(jìn)行檢測，得出反應(yīng)時(shí)間－OD值曲線，從中預(yù)測所需反應(yīng)時(shí)間。下一步再進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)曲線的測定，目的就是進(jìn)行OD值與酶活力單位的換算，這樣才能進(jìn)行定量分析。設(shè)計(jì)標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)應(yīng)注意底物空白的設(shè)置。接著進(jìn)行樣品的測定，得到的OD值經(jīng)標(biāo)準(zhǔn)曲線換算得到酶活力單位（U）。
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