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微生物檢驗中常見的半定量
發布日期:2025-10-30 20:31:35


微生物檢驗中常見的半定量


在臨床微生物實驗室中,經常會用到半定量比如“+,++,+++,++++”,它既不像 “定性檢測” 只說 “有或無”,也不像 “定量檢測” 要具體精確到每毫升多少個細菌,但它也能幫助臨床醫生做出快速感染判斷、在用藥指導中發揮一定的作用,今天一起來了解下微生物檢驗中常見的“半定量“。


Part.1痰培養

痰培養由于標本粘稠且易受上呼吸道菌群污染,難以進行絕對定量。因此,實驗室常根據平板上的菌落分布和數量進行半定量檢驗,輔助判斷感染的嚴重程度。


依據平板上同一種菌在

四區劃線內的菌落數

判定如下:


一區
二區
三區

+

(少見)

<10



++

(少量)

>10

<5


+++

(中等)

>10

>5

<5

++++

(多量)

>10

>5

>5


合格痰標本中優勢菌常呈中度以上生長(+++)

或合格痰標本菌少量生長,

但與涂片鏡檢結果一致

(如肺炎鏈球菌,卡他莫拉菌等)。

Part.2革蘭染色

革蘭染色(Gram stain) 是由丹麥醫生漢斯·克里斯蒂安·革蘭于1884年創立的一種細菌鑒別染色技術,是微生物學中最基礎、最重要的染色方法之一,快速區分G?和G?菌,為后續鑒定提供方向。


根據觀察到的菌數量

判定如下:


細菌計數(油鏡)

1+

少于1個

2+

1~5個

3+

6~30個

4+

>30個


Part.3抗酸染色

抗酸染色是一種主要用于檢測如結核分枝桿菌等含有大量脂質(如分枝菌酸)的抗酸菌染色方法。這類細菌因細胞壁結構致密,普通染色難以著色,而抗酸染色利用耐酸性強的染料(如石炭酸復紅),在加熱輔助下使染料滲入并牢固結合于細菌體內,使其呈現紅色。


根據觀察視野數量及菌條數

判定如下:

陰性

未查見抗酸桿菌/300個視野

具體條數1~8條/300個視野
1+

3~9條/100個視野

2+

1~9條/10個視野

3+

1~9條/個視野

4+

≥10條/個視野

Part.4抗酸熒光染色

與抗酸染色不同,抗酸熒光染色利用金胺O等熒光染料對含有脂質細胞壁的細菌進行特異性染色,使菌體在熒光顯微鏡下呈現明亮的黃綠色熒光。

根據觀察視野數量及菌條數

判定如下:

陰性

未查見抗酸桿菌/50個視野

具體條數1~9條/50個視野
1+

10~49條/50個視野

2+

1~9條/個視野

3+

10~99條/個視野

4+

≥100條/個視野


Part.5結核固體培養

結核固體培養不僅能用于結核分枝桿菌的分離與確診,還可進一步開展菌種鑒定和藥物敏感性試驗。


根據菌落在斜面培養基上的生長狀況

判定如下:

陰性

斜面無菌落生長

具體數菌落生長<斜面1/4
1+

菌落生長占斜面1/4

2+

菌落生長占斜面1/2

3+

菌落生長占斜面3/4

4+

菌落生長布滿整個斜面


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