蛋白質呈色反應—坂口反應實驗
【實驗原理】
蛋白質在堿性溶液中與次氯酸鹽（或次溴酸鹽）和α-萘酚作用產生紅色的產物。這是由于蛋白質分子中精氨酸胍基的特征反應。許多胍的衍生物如胍乙酸、胍基丁胺等也發生此反應。精氨酸是唯一呈正反應的氨基酸，反應靈敏度達1：250000。
【Principle】
Protein react with sodium bromate solution and α-naphthol solution in alkali condition to produce red component. This is a special reaction of arginine’s carbamidine, which is useful in quantitating and determining the natures of protein and the amino acid. The reaction is shown as below.
生成的氨可被次溴酸鈉氧化生成氮。在次溴酸鈉緩慢作用下，有色物質繼續氧化，引起顏色消失，因此過量的次溴酸鈉對反應不利。加入濃尿素，破壞過量的次溴酸鈉，能增加顏色的穩定性。此反應可以用來定性鑒定含有精氨酸的蛋白質和定量測定精氨酸的含量。
【 試劑 】
1.蛋白質溶液：與雙縮尿反應相同
2.次溴酸鈉溶液
3.10%NaOH溶液
4.0.2%α-萘酚溶液
5.0.01%精氨酸溶液
【實驗操作】
1． 于 試管 中加入蛋白質溶液1ml，再加10%NaOH溶液0.5ml，0.2%α-萘酚2滴，混合后再加次溴酸鈉溶液2滴，觀察現象
2． 取0.01%精氨酸溶液1ml，按上述操作觀察現象
【Reagent】
1.Protein solution (the same as biuret reaction)
2.Sodium bromate solution
3. 10% NaOH solution
4.0.2%α- naphthol solution
5. 0.01% arginine solution
【Procedures】
1.1ml of protein solution is added into a test tube, then 0.5 ml of 10%NaOH solution and two drops of 0.2%α- naphthol are added. After mixing, 2 drops of sodium bromate solution are added, and then observe the phenomenon.
2.Add 1 ml of 0.01% arginine solution according to the same procedure above，then observe the phenomenon.
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