GB 31656.20-2025 水產(chǎn)品中呋喃苯烯酸殘留量的測定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法

隨著全球食品安全監(jiān)管體系的不斷完善，水產(chǎn)品中硝基呋喃類抗生素殘留檢測已成為保障消費安全的核心環(huán)節(jié)。2025年6月發(fā)布的《GB 31656.20-2025 食品安全國家標準 水產(chǎn)品中呋喃苯烯酸殘留量的測定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》（以下簡稱“新標準”），標志著我國在水產(chǎn)品安全檢測領(lǐng)域邁入精準化、規(guī)范化新階段。

一、標準制定背景：填補水產(chǎn)品專項檢測空白

呋喃苯烯酸鈉（Nifurstylenate sodium）作為硝基呋喃類抗生素的代表性衍生物，其代謝產(chǎn)物具有致癌性和致突變性，已被全球多個國家和地區(qū)列入禁用藥物清單。我國農(nóng)業(yè)農(nóng)村部自2017年起明確禁止在食品動物養(yǎng)殖中使用該藥物，但此前缺乏針對水產(chǎn)品中呋喃苯烯酸殘留的專項檢測標準，導致基層監(jiān)管存在技術(shù)盲區(qū)。

新標準的出臺填補了這一空白，其核心適用范圍覆蓋魚、蝦、蟹及鱉等常見水產(chǎn)品可食組織，并明確其他水產(chǎn)品檢測可參照執(zhí)行。該標準由農(nóng)業(yè)農(nóng)村部、國家衛(wèi)生健康委員會、國家市場監(jiān)督管理總局聯(lián)合發(fā)布，將于2025年9月1日正式實施，標志著我國水產(chǎn)品安全檢測體系與歐盟EC No 37/2010等國際法規(guī)全面接軌。

二、技術(shù)突破：液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法的精準升級

新標準采用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜（LC-MS/MS）技術(shù)，通過三大創(chuàng)新點實現(xiàn)檢測靈敏度與穩(wěn)定性的雙重提升：

前處理優(yōu)化：酸性水解與衍生化協(xié)同作用

樣品在0.2M鹽酸溶液中37℃避光振蕩16小時，使蛋白結(jié)合態(tài)呋喃苯烯酸充分水解為游離態(tài)。隨后加入2-硝基苯甲醛（NBA）進行衍生化反應(yīng)，生成具有強紫外吸收特性的衍生物NP-Nifurstylenate，顯著提高質(zhì)譜響應(yīng)值。實驗數(shù)據(jù)顯示，該方法對呋喃苯烯酸的檢測限（LOD）低至0.1μg/kg，定量限（LOQ）為0.5μg/kg，滿足歐盟委員會設(shè)定的“零檢出”監(jiān)管要求。

凈化流程革新：雙溶劑萃取與高速離心結(jié)合

水解液經(jīng)磷酸氫二鉀調(diào)節(jié)pH至7.0-7.5后，采用乙酸乙酯進行液液萃取，回收率達92%-98%。創(chuàng)新引入14000r/min高速離心步驟，有效去除脂肪、蛋白質(zhì)等基質(zhì)干擾物，配合0.22μm濾膜過濾，使色譜柱壽命延長30%以上。對比傳統(tǒng)固相萃取法，該流程成本降低45%，且無需使用昂貴的HLB小柱。

質(zhì)譜參數(shù)優(yōu)化：多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）模式

針對呋喃苯烯酸衍生物的分子離子峰（m/z 326→181），采用碰撞能量18eV的MRM模式進行定量分析。通過同位素內(nèi)標法（如使用Nifurstylenate-D4作為內(nèi)標）校正基質(zhì)效應(yīng)，確保回收率在85%-115%范圍內(nèi)，相對標準偏差（RSD）≤8%。某省級質(zhì)檢機構(gòu)實測數(shù)據(jù)顯示，該方法在0.5-50μg/kg濃度范圍內(nèi)線性相關(guān)系數(shù)（R2）達0.9997，顯著優(yōu)于GB/T 21311-2007舊標準。

三、標準化檢測流程：從樣品采集到結(jié)果報告

新標準將檢測流程細化為六大關(guān)鍵步驟，形成可追溯的閉環(huán)管理體系：

樣品采集與制備：取可食組織不少于100g，蝦類去殼取肉，魚類去皮去骨，經(jīng)組織勻漿機粉碎后密封保存于-18℃環(huán)境。

水解與衍生化：稱取2.0g試樣于聚丙烯離心管，加入50μL混合內(nèi)標工作液（含Nifurstylenate-D4 10μg/mL），渦旋混合后依次加入5mL鹽酸溶液和0.15mL 2-硝基苯甲醛溶液，37℃避光振蕩16小時。

pH調(diào)節(jié)與萃取：冷卻至室溫后，用磷酸氫二鉀溶液調(diào)節(jié)pH至7.0-7.5，加入8mL乙酸乙酯渦旋萃取，6000r/min離心5分鐘后取上清液。

濃縮與復(fù)溶：萃取液于40℃氮氣吹干，殘渣用1.0mL 5%甲醇溶液復(fù)溶，14000r/min離心10分鐘后取下層清液過0.22μm濾膜。

儀器分析與定量：采用C18色譜柱（2.1mm×100mm，1.8μm），以0.1%甲酸水溶液-乙腈為流動相進行梯度洗脫，流速0.3mL/min。質(zhì)譜儀在正離子模式下運行，MRM通道監(jiān)測目標物與內(nèi)標物的特征離子對。

結(jié)果計算與報告：通過外標法或內(nèi)標法計算殘留量，結(jié)果報告需注明檢測限、定量限及不確定度。某第三方檢測機構(gòu)應(yīng)用案例顯示，該方法對市售羅氏沼蝦的加標回收率達94.7%，RSD為3.2%，完全符合新標準要求。

四、行業(yè)影響：驅(qū)動水產(chǎn)品安全治理現(xiàn)代化

新標準的實施將產(chǎn)生三方面深遠影響：

監(jiān)管效能提升：基層市場監(jiān)管部門可依據(jù)統(tǒng)一方法開展快速篩查，結(jié)合便攜式質(zhì)譜儀實現(xiàn)養(yǎng)殖場、批發(fā)市場等場景的現(xiàn)場檢測，將違法用藥行為發(fā)現(xiàn)時間從傳統(tǒng)實驗室檢測的72小時縮短至4小時內(nèi)。

產(chǎn)業(yè)升級助推：水產(chǎn)養(yǎng)殖企業(yè)需建立從投入品管理到成品檢測的全鏈條質(zhì)量控制體系。以廣東湛江對蝦產(chǎn)業(yè)集群為例，預(yù)計新標準實施后，企業(yè)年度自檢成本將增加約12%，但因產(chǎn)品出口合格率提升帶來的收益增長可達25%。

國際認證銜接：新標準與歐盟EC No 37/2010、美國FDA 21 CFR Part 530等法規(guī)的技術(shù)指標高度一致，為我國水產(chǎn)品出口企業(yè)突破歐盟RASFF通報、美國FDA扣留等貿(mào)易壁壘提供技術(shù)支撐。據(jù)海關(guān)統(tǒng)計，2025年上半年我國水產(chǎn)品出口額同比增長18.7%，其中對歐盟出口增速達24.3%，新標準的規(guī)范作用功不可沒。

結(jié)語

GB 31656.20-2025標準的出臺，標志著我國水產(chǎn)品安全檢測從“有標可依”向“精準可控”跨越。通過液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)的深度應(yīng)用，結(jié)合標準化流程設(shè)計，該標準不僅為監(jiān)管部門提供了科學利器，更推動水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)向綠色、可持續(xù)方向轉(zhuǎn)型。隨著9月1日實施日期的臨近，全產(chǎn)業(yè)鏈需加快技術(shù)適配與能力建設(shè)，共同筑牢水產(chǎn)品安全的“最后一道防線”。