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兼并引物(Degenerate Primer)PCR
發布日期:2022-11-14 08:38:31


兼并引物(Degenerate Primer)PCR


 密碼子具有兼并性,單以氨基酸順序推測編碼的DNA序列是不精確的,但可以設計成對兼并引物,擴增所有編碼已知順序的核酸序列。用兼并引物時寡核苷酸中核苷酸序列可以改變,但核苷酸的數量應相同。兼并度越低,產物特異性越強,設計引物時應盡量選擇兼并性小的氨基酸,并避免引物3’末端兼并,針對兼并的混合引物已成功地用于未知靶DNA的擴增、克隆和序列分析。現已成功地克隆了豬尿酸氧化酶基因糖尿病相關肽基因和哺乳動物與禽類的嗜肝病毒基因。用脫氧肌苷(deoxyinosine;DI)引物進行PCR可以代替編碼蛋白的多種兼并密碼子中的兼并堿基,DI的特異性主要受cDNA濃度影響。


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