流感/副流感嗜血桿菌鑒定之“衛星現象”

流感嗜血桿菌及副流感嗜血桿菌均為嗜血桿菌屬、革蘭氏陰性球桿菌。無芽孢、無鞭毛（多數）、多形性 。需氧/兼性厭氧，5%–10% CO?促生長；營養要求高，在巧克力平板上流感嗜血桿菌形成圓形、光滑、濕潤、邊緣整齊、呈露滴狀的小菌落；副流感嗜血桿菌的菌落稍微大，灰色、濕潤、不透明。但單從菌落形態還是難以判別兩種菌。

流感嗜血桿菌-巧克力平板

一、兩者核心差異：

1. 培養與因子需求：

- 流感嗜血桿菌：必須同時需要X+V因子；血平板衛星現象陽性 。

- 副流感嗜血桿菌：僅需V因子，不需要X因子；MH平板衛星現象陽性。

2. 生化反應（快速區分）

- 硝酸鹽還原：流感（+）；副流感 （-）。

- 觸酶：流感 （-）；副流感（+）。

- 吲哚/脲酶/鳥氨酸脫羧酶：流感多為++?；副流感多為?++。

二、快速鑒別流程（實驗室常用）

1. 革蘭染色：G?短小桿菌 ，細細碎碎的感覺。嗜血桿菌屬

2. 衛星現象（常用）：

實驗方法: 

接種：將疑似流感嗜血桿菌的菌液分別涂布接種在血平板和M-H平板上。

共培養：再將金葡菌（通常是標準菌株）點種或劃種。35-37℃孵育24-48小時。

觀察：培養后，如果在金葡菌菌落周圍出現一圈明顯比遠離區域更大的嗜血桿菌菌落，即可判斷為“衛星現象”陽性。（在M-H平板上接種葡萄球菌時，只具備V因子）

M-H平板上衛星現象陽：副流感嗜血桿菌，

血平板衛星現象陽，M-H平板上衛星現象陰性：流感嗜血桿菌。

衛星現象原理：流感嗜血桿菌的生長需要但自身不能合成的兩種關鍵營養物質：X因子（血紅素）和V因子（煙酰胺腺嘌呤二核苷酸，NAD）。血液中雖含有這兩種因子，但在紅細胞內，不能被直接利用。

金黃色葡萄球菌在生長時：（a） 會裂解紅細胞 → 釋放 X 因子（血紅素）（b） 會分泌 V 因子（NAD）所以，血平板上同時接種兩種菌時，葡萄球菌提供流感嗜血桿菌必需的 X、V 因子，流感嗜血桿菌只圍著在葡萄球菌旁邊生長，形成小菌落，離得越遠，因子越少，越長越小。