金黃色葡萄球菌之藥敏報告審核要點
金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S. aureus)為葡萄球菌屬,是革蘭氏陽性球菌代表,鏡下常葡萄串狀排列,無芽孢、鞭毛,大多數無莢膜;菌落為圓形,表面光滑,無色/金黃色菌落,β溶血。為臨床常見致病菌。
一、鑒定關鍵特征: 革蘭陽性球菌,葡萄串狀排列;觸酶陽性,區分鏈球菌; 凝固酶陽性,金葡菌標志性特征; 血平板:β溶血,無色/微黃/金黃色菌落。
二、藥敏報告審核要點
1. 青霉素耐藥:機制:產β-內酰胺酶(青霉素酶)。絕大多數金葡產青霉素酶,遇金葡青霉素敏感(MIC≤0.12μg/ml)時,需測β內酰胺酶。
—頭孢硝噻吩試驗:取頭孢硝噻吩紙片或試紙條取分純單菌落,顏色由黃色變為紅色或粉紅色,報告β-內酰胺酶陽性(或青霉素耐藥)。
假如頭孢硝噻吩試驗陰性,且必須用青霉素治療的情況下(如心內膜炎),在報告青霉素敏感前,執行邊緣試驗。
—紙片邊緣試驗
操作:調菌懸液0.5麥氏濁度,按標準紙片擴散法步驟貼10U的青霉素,35-37℃孵育16~18h后,觀察結果。
結果判讀:(1)青霉素抑菌圈邊緣清晰銳利(“絕壁狀”),表示邊緣試驗結果陽性,待測菌株產β-內酰胺酶,青霉素耐藥;(2)青霉素抑菌圈邊緣模糊(“沙灘狀“)提示試驗結果陰性,待測菌株非產β-內酰胺酶,青霉素敏感。
2. 甲氧西林(苯唑西林)耐藥:機制:主要為獲得mecA基因,編碼表達PBP2(青霉素結合蛋白2a),對所有β-內酰胺類均耐藥(抗MRSA的藥物除外,如:頭孢洛林)。判定為耐甲氧西林金葡菌(MRSA)。
非mecA基因如mecC介導的甲氧西林(苯唑西林)耐藥機制罕見。mecC陽性株表現為對頭孢西丁耐藥、苯唑西林敏感。若頭孢西丁陽性,苯唑西林敏感,建議對頭孢西丁結果進行復核(注意33~35℃孵育)后再修正苯唑西林的藥敏結果。
MRSA 檢測方法可選擇苯唑西林MIC法、頭孢西丁紙片法/MIC法:
- 頭孢西丁R → MRSA(耐甲氧西林金葡菌)
- 僅頭孢西丁S →MSSA(甲氧西林敏感)
- 苯唑西林MIC≤0.25 報“S”;≥5 報“R”;0.5-2.0 根據頭孢西丁K-B法結果→≥25 報“S”,小于等于24 報“R”
3. 克林霉素耐藥:藥敏試驗結果顯示紅霉素耐藥、克林霉素敏感的菌株,需進行誘導性克林霉素耐藥(ICR)試驗(即D試驗)。D試驗陽性需報告克林霉素耐藥。
4. 萬古霉素、利奈唑胺、達托霉素
- S為正常,中介/耐藥必須復核:重新鑒定、重做藥敏、傳代純化、報臨床危急值
頭孢西丁定MSSA/MRSA,青霉素多耐藥別亂報S,克林霉素D試驗不能落,萬古霉素異常必復核。


