常見致病性葡萄球菌鑒別之凝固酶試驗

葡萄球菌（Staphylococcus）是一類革蘭陽性球菌，按凝固酶分類分為（1） 凝固酶陽性葡萄球菌：金黃色葡萄球菌（S. aureus），金黃色菌落，β溶血， 致病力強，可致化膿感染、敗血癥、MRSA。（2） 常見凝固酶陰性葡萄球菌（CoNS）： 表皮葡萄球菌、 溶血葡萄球菌、腐生葡萄球菌、路鄧葡萄球菌；醫源性感染多見，常見于植入物、導管、免疫低下患者。從菌落形態特征常常難以區分，凝固酶試驗是鑒定致病性葡萄球菌的重要試驗。

一、凝固酶試驗原理：葡萄球菌產生兩種凝固酶

- 結合凝固酶（凝聚因子）：位于細胞壁，直接作用于血漿中纖維蛋白原，直接和血漿里的纖維蛋白原結合，使纖維蛋白原變成纖維蛋白，包裹菌體而使細菌凝集成顆粒、團塊；玻片法可檢測

- 游離凝固酶：分泌至菌體外，與血漿中的凝血酶原協同因子作用，被激活成類凝血酶，使血漿中的纖維蛋白原 → 纖維蛋白，使血漿凝固成膠凍狀，倒置不流動。試管法可同時測定結合型和游離型凝固酶。

二、操作與判讀

- 玻片法（快速初篩）

操作：玻片兩端分別滴生理鹽水與血漿，取待檢菌混勻，立即觀察 。5–10s內顆粒狀或團塊狀凝集，鹽水側無自凝為陽性；陰性需用試管法確認。

- 試管法（確證）

操作：選2-3管正常血漿（一般血凝項目及感染項目正常、排除一下心腦血管疾病、內分泌等疾病），血漿1:1混勻后，用生理鹽水1:4稀釋混合血漿0.5 mL，挑菌充分乳化為菌懸液。37℃孵育，30min、2h、4h、6h觀察 。血漿呈膠凍樣凝固，倒置不流動為陽性 。

2. 各葡萄球菌凝固酶試驗結果

極簡記憶：

- 溶血+雙陽 → 金葡

- 溶血+玻片可陽、試管陰 → 路鄧

- 溶血+全陰 → 溶葡

- 不溶血+尿+新生耐藥 → 腐生

- 不溶血+絕大多數 → 表葡。