HPLC→UHPLC方法轉(zhuǎn)換
液相色譜按照耐壓分類,有常壓液相色譜、中壓液相色譜、高壓液相色譜和超高壓液相色譜常壓色譜、中壓色譜、高壓色譜與超高壓色譜,有時(shí)也會(huì)遇到不同耐壓LC相互轉(zhuǎn)換的情況,比如,HPLC 的方法轉(zhuǎn)換到 UHPLC 方法。
一、為什么要從 HPLC 轉(zhuǎn)成 UHPLC 呢?
1. 原 HPLC 時(shí)間太長(zhǎng)(>20 min),想提速;
2. 樣品數(shù)量大、通量要求高(如質(zhì)控、反應(yīng)監(jiān)測(cè)、藥分);
3. 原方法分離度足夠,有壓縮時(shí)間的空間;
4. 想節(jié)省溶劑、減少?gòu)U液、降低成本。
前提:已有 UHPLC 儀器(耐壓 ≥ 600 bar),有UHPLC色譜柱。
二、HPLC → UHPLC 核心轉(zhuǎn)換原則
保持保留行為與分離順序基本不變,大幅縮短時(shí)間。
1. 填料種類不改變,保持選擇性;
2. 只縮小色譜柱直徑、柱長(zhǎng)、填料粒徑;
3. 按照柱直徑的變化,調(diào)整流速;
4. 按照柱長(zhǎng)的變化,調(diào)整梯度時(shí)間;


