核酸電泳核心試劑速查表

一、電泳緩沖液 (Electrophoresis Buffer)

位置：倒入電泳槽中，浸沒整個凝膠。

核心作用：導(dǎo)電 + 維持 pH + 穩(wěn)定核酸電荷。

常用類型：

TAE (Tris - 醋酸 - EDTA)：分辨率一般，適合大片段 DNA (>1kb) 及膠回收。

TBE (Tris - 硼酸 - EDTA)：緩沖能力強(qiáng)，分辨率高，適合小片段 DNA (<1kb) 或長時間電泳。

關(guān)鍵成分：

Tris：維持弱堿性 pH (≈8.0)，確保 DNA 帶負(fù)電向正極移動。

EDTA：螯合 Mg2+，抑制 DNA 酶，保護(hù)核酸。

醋酸 / 硼酸：提供離子，保證電流傳導(dǎo)。

二、載樣緩沖液 (Loading Buffer / 上樣緩沖液)

位置：與核酸樣品混合后，一起點(diǎn)入凝膠加樣孔內(nèi)。

核心作用：輔助上樣 + 監(jiān)控電泳進(jìn)程。

關(guān)鍵成分與功能：

密度劑（甘油 / 蔗糖）：增加樣品比重，使樣品沉底，防止飄散。

指示劑（溴酚藍(lán) / 二甲苯青）：

溴酚藍(lán) (Bromophenol Blue)：藍(lán)色，遷移快，對應(yīng)≈300-500bp DNA。

二甲苯青 (Xylene Cyanol FF)：藍(lán)綠色，遷移慢，對應(yīng)≈2000-5000bp DNA。

功能：肉眼實(shí)時追蹤電泳前沿，判斷何時停止。

EDTA：防止樣品降解。

三、核酸染料 (Nucleic Acid Stain)

位置：預(yù)先加入凝膠中，或電泳后浸泡凝膠。

核心作用：特異性標(biāo)記核酸，使其在紫外 / 藍(lán)光下顯影。

常用類型：

溴化乙錠 (EB)：經(jīng)典染料，嵌入 DNA 堿基對，紫外下發(fā)紅色熒光。強(qiáng)致癌，現(xiàn)已少用。

SYBR Safe / GelRed / GoldView：安全無毒替代品，靈敏度高，藍(lán)光 / 紫外激發(fā)。

原理：染料分子結(jié)合 DNA 后，熒光信號顯著增強(qiáng)，從而顯示條帶位置。

四、指示劑 (Indicator / 示蹤染料)

位置：載樣緩沖液內(nèi)的成分（溴酚藍(lán)、二甲苯青）。

核心作用：指示電泳進(jìn)程，不標(biāo)記 DNA。

與核酸染料的本質(zhì)區(qū)別：

指示劑：小分子有色染料，只負(fù)責(zé)帶路，不與 DNA 結(jié)合。

核酸染料：熒光分子，特異性結(jié)合 DNA，負(fù)責(zé)顯色。

總結(jié)對比表

一句話口訣

槽里裝的是緩沖（電泳緩沖液），樣品混的是載樣（載樣緩沖液）；

膠里埋的是染料（核酸染料），跟著跑的是指示劑（溴酚藍(lán)）。