細胞污染了可以拯救嗎???
污染不僅影響結果的準確性,還可能導致實驗失敗。了解污染類型和處理措施是確保實驗成功的關鍵。
識別污染類型
細胞污染主要包括細菌、真菌、支原體和黑膠蟲污染。
細菌污染:培養液變黃、渾濁,顯微鏡下可見細菌。常因操作不規范導致。
真菌污染:培養液中有淡黃色或白色漂浮物,顯微鏡下可見菌絲。多來自空氣中的孢子。
支原體污染:細胞生長變慢,邊界模糊,培養基無變化。難以用光學顯微鏡檢測。
黑膠蟲污染:培養基外觀正常,顯微鏡下可見黑色小點,這些點會做布朗運動。抗生素無效。
確認污染后,應立即隔離受污染的細胞,防止擴散。
處理措施
1. 細菌和真菌污染:
使用抗生素如青霉素-鏈霉素或慶大霉素。
輕度污染可用PBS溶液清洗,再用高濃度抗生素處理。
嚴重污染建議丟棄細胞。
預防為主,嚴格遵守無菌操作。
2. 支原體污染:
使用支原體清除試劑,如Mycoplasma Remover Reagent。
25 μg/ml濃度處理2-3周。
或添加環丙沙星注射液,20 μg/mL培養2代,后10 μg/mL持續2周。
細胞狀態差時,建議丟棄。
3. 黑膠蟲污染:
使用黑膠蟲清除劑,確保血清無污染。
增加細胞密度,培養2-3代。
狀態不佳時,消毒后丟棄。
預防措施:使用高品質血清。


