實驗室常用培養基配方合集

一、細菌通用培養基

1. LB 培養基（大腸桿菌最常用）

液體 LB

? 胰蛋白胨：10 g/L

? 酵母提取物：5 g/L

? NaCl：10 g/L

? 用去離子水定容至 1 L

? pH 調至 6.8–7.2

? 滅菌：121℃，15–20 min

LB 固體（平板）

? 在上述液體配方基礎上加 瓊脂粉 15 g/L

2. 2×YT 培養基（菌體密度更高，提質粒/蛋白常用）

? 胰蛋白胨：16 g/L

? 酵母提取物：10 g/L

? NaCl：5 g/L

? 定容 1 L，pH 6.8–7.2

? 滅菌：121℃，15–20 min

3. SOC 培養基（感受態細胞復蘇專用）

? 胰蛋白胨：20 g/L

? 酵母提取物：5 g/L

? NaCl：0.5 g/L

? 1 M KCl：2.5 mL

? 定容后調 pH 7.0

? 滅菌后冷卻至 60℃ 以下加入：

? 2 M MgCl?：5 mL

? 1 M 葡萄糖：20 mL
二、篩選與抗性培養基（通用添加量）

以下均為滅菌后冷卻加入，不可高溫滅菌：

? 氨芐青霉素 Amp：100 μg/mL

? 卡那霉素 Kan：50 μg/mL

? 氯霉素 Cm：25–34 μg/mL

? 四環素 Tet：10–15 μg/mL

? IPTG（誘導）：0.1–1 mM

? X-gal（藍白斑）：20–40 μg/mL
三、酵母培養基

YPD 培養基（釀酒酵母通用）

液體 YPD

? 酵母提取物：10 g/L

? 蛋白胨：20 g/L

? 葡萄糖：20 g/L

? 定容 1 L，自然 pH 約 5–6，一般不調

? 滅菌：115℃，15–20 min（防糖焦化）

YPD 固體

? 加瓊脂粉 20 g/L

YNB 基礎培養基（營養缺陷型篩選用）

? YNB 粉末：6.7 g/L

? 葡萄糖：20 g/L

? 定容 1 L，過濾除菌或 115℃ 滅菌

? 根據菌株需求添加相應氨基酸/營養缺陷混合物
四、真菌/霉菌培養基

PDA 馬鈴薯葡萄糖瓊脂（霉菌、真菌通用）

? 馬鈴薯（去皮）：200 g

? 切片煮沸 20–30 min，紗布過濾取汁

? 葡萄糖：20 g/L

? 瓊脂：15–20 g/L

? 定容 1 L，自然 pH 約 5–6

? 滅菌：115–121℃，15–20 min
五、放線菌培養基

高氏一號培養基

? 可溶性淀粉：20 g/L

? KNO?：1 g/L

? K?HPO?：0.5 g/L

? MgSO?·7H?O：0.5 g/L

? NaCl：0.5 g/L

? FeSO?·7H?O：0.01 g/L

? 瓊脂：15–20 g/L

? pH 調至 7.2–7.4

? 滅菌：121℃，15–20 min
六、基礎無機鹽 / 緩沖液（實驗必用）

1. PBS 緩沖液（pH 7.4）1 L

? NaCl：8 g

? KCl：0.2 g

? Na?HPO?：1.44 g

? KH?PO?：0.24 g

? 定容 1 L，pH 7.4

2. 1 M Tris-HCl（pH 8.0）

? Tris 堿：121.1 g

? 溶于 800 mL 水

? 濃 HCl 調 pH 至 8.0

? 定容 1 L
七、配培養基避坑要點

1. pH 偏差 0.3 以上，菌大概率不長或長不好

2. 含糖培養基盡量 115℃ 滅菌，防止焦化抑制生長

3. 抗生素、IPTG、葡萄糖必須滅菌冷卻后加

4. 倒平板溫度 50–60℃ 最合適，太燙殺抗性，太涼結塊

5. 液體搖瓶裝液量不超過 1/2，保證溶氧。