黑曲霉的實驗室檢測
黑曲霉是一種廣泛分布于自然環境中的絲狀真菌,普遍存在于土壤、谷物和室內環境中。黑曲霉屬于條件致病菌,免疫力低下人群易感,是引起曲霉?。ㄓ绕涫欠吻共。┑闹饕≡?。其快速生長的黑色菌落和鏡下覆蓋于球形頂囊全部表面的雙層小梗、放射狀分生孢子頭、粗糙孢子是鑒定的核心形態學依據。
1. 菌落特征
SDA上生長迅速,25-30°C,3-4d即可成熟,初期為白色絨狀,隨著分生孢子的產生,菌落顏色從黃色變為黑色,表面呈粉末狀。
菌絲:無色、分隔、通常呈銳角(45°角,鹿角狀)分枝,負責吸收營養物質,支撐與固定菌體。分生孢子梗:由足細胞向上生長,分生孢子梗無隔,梗壁光滑、較厚。作為“支柱”,將頂囊和孢子高高舉起,有利于孢子的空氣傳播。頂囊:分生孢子梗頂端膨大形成的球形或近球形的泡狀結構。雙層小梗:覆蓋于頂囊的全部表面(可孕區大),?;L,瓶梗短。分生孢子:球形或近球形,厚壁,表面粗糙,有刺狀突起或縱向條紋。分生孢子鏈狀排列形成分生孢子鏈,成熟后呈黑色至黑褐色,是菌落呈現黑色的原因。成熟的孢子鏈易斷裂,釋放單個孢子,黑曲霉主要通過產生大量無性孢子進行繁殖和傳播。
分生孢子頭:放射狀或球狀,整體結構清晰,老后分裂成幾個圓柱狀結構,是黑曲霉鑒定的關鍵。
臨床標本如痰液、肺泡灌洗液、耳道分泌物等經10% KOH溶液消化處理樣本后鏡檢,可見無色、分隔、呈鹿角狀的菌絲。真菌培養見黑色絨狀/顆粒狀菌落、鏡下見雙層小梗和輻射狀分生孢子頭,高度提示為黑曲霉。黑曲霉屬于條件致病菌,其致病性主要與宿主免疫狀態有關,常引起侵襲性曲霉病(最常見和最嚴重)、慢性/腐生性感染,如曲霉球、外耳道曲霉病、過敏性支氣管肺曲霉病等。治療藥物包括伏立康唑,兩性霉素B(及其脂質制劑)、伊曲康唑、泊沙康唑、艾沙康唑等,棘白菌素類(如卡泊芬凈、米卡芬凈)通常作為聯合用藥,黑曲霉對氟康唑和5-氟胞嘧啶耐藥。參考書目:《臨床微生物學診斷與圖解》、《醫學真菌檢驗與圖解(第二版)》。