實驗室常用真菌培養基
不同的真菌培養基根據其成分組合,具有不同的選擇性和鑒別性,實驗室常用真菌培養基主要包括SDA、PDA和真菌顯色培養基。
1 沙保羅瓊脂培養基(SDA)主要成分為葡萄糖(碳源)、蛋白胨(氮源)、瓊脂;pH 5.6左右,有利于真菌生長,同時抑制大多數細菌(某些乳酸菌、醋酸菌仍可生長),是真菌分離和培養的“黃金標準”和最基礎培養基。主要用于臨床標本中致病性真菌的初級分離和培養、真菌總數的測定、保存真菌菌種,但易受細菌和快速生長霉菌的污染。
1.1沙保羅瓊脂培養基+抗生素
可選擇性添加氯霉素和/或 慶大霉素(有效抑制>99%的污染細菌);放線菌酮可強烈抑制生長快速的腐生霉菌(如青霉、曲霉的某些非致病種),從而提高生長緩慢的致病性真菌(如組織胞漿菌、皮炎芽生菌)的分離率。但須注意,它會抑制新型隱球菌和接合菌綱(毛霉、根霉),因此不能單獨用于分離這些病原體。
放線菌酮是一種蛋白質合成抑制劑,能直接作用于核糖體,對許多真核微生物具有毒性。
2 馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養基(PDA)
除葡萄糖、瓊脂成份外,還包括馬鈴薯浸粉(提供豐富的維生素和生長因子,促進真菌生長和孢子形成)。許多真菌在PDA上能產生豐富的孢子,形態特征典型,主要用于促進真菌產孢,形態學鑒定;真菌的培養和保藏等。
除基礎成份外含有抗生素(抑菌)使其具有高選擇性,其獨特的特異性酶底物和顯色劑使得不同菌落呈現獨特的顏色,可在24-48小時內根據顏色直接初步鑒定到種或屬,大大縮短鑒定時間。主要用于臨床病原真菌的快速鑒定,如白色念珠菌(綠色)、熱帶念珠菌(藍灰色)、光滑念珠菌(紫色/淡粉色)、克柔念珠菌(粉紫色,菌落扁平、干燥)等。
檢測原理:培養基中含有特定的酶底物,這些底物與顯色基團偶聯。不同念珠菌分泌的特異性酶(如β-葡萄糖苷酶、N-乙酰-β-半乳糖苷酶)能水解底物,釋放出顯色基團,使菌落呈現獨特顏色。
臨床工作中,初步分離常選用SDA;促進生長和產孢選用PDA;或直接用科瑪嘉顯色培養基進行快速篩查和初步鑒定臨床標本中的念珠菌,為減少漏檢,常聯合使用多種培養基。


