ATCC11859 巴氏芽孢桿菌

一、菌種基本信息

學名與分類

中文名：巴氏芽孢桿菌

拉丁學名：Sporosarcina pasteurii（曾用名：Bacillus pasteurii）

生物安全等級：1級（無已知健康風險，適合基礎實驗室操作）

保藏編號與別名

ATCC編號：11859

其他保藏號：DSM 33、NCIB 8219、NCTC 4822 等

模式菌株：是（國際公認的標準參考菌株）

二、培養與保存條件

培養基配方

基礎培養基：CASO AGAR（酪蛋白胨15g + 大豆蛋白胨5g + 氯化鈉5g + 瓊脂20g + 蒸餾水1L，pH 7.3）

關鍵添加劑：尿素（20g/L），用于誘導脲酶活性

培養參數

溫度：28–30℃

時間：24–48小時

氧氣需求：需氧培養

保存方法

凍干粉：4–10℃（保質期2–25年）

斜面菌種：4–10℃（按說明書定期轉接一次）

甘油菌：-80℃（保質期2–5年）

三、活化操作步驟（凍干粉復蘇）

溶解菌粉：

用無菌吸管吸取0.3–0.5 mL液體培養基（或無菌水）注入凍干管，輕搖至完全溶解

接種培養：

將全部菌懸液接種至1–2支斜面培養基，30℃培養48–72小時

關鍵注意事項：

不可保留菌粉：凍干管開封后需一次性用完，殘留菌粉無法保存

延遲生長：休眠菌復蘇可能需延長培養時間，屬正常現象

無菌操作：全程在生物安全柜中進行，廢棄物需滅菌處理

四、核心特性與應用

功能特性：

環境工程：微生物誘導碳酸鈣沉淀（MICP），用于土壤加固、巖石裂縫修復

工業催化：尿素降解及氨循環工藝優化

高產脲酶：催化尿素水解為氨和二氧化碳，關鍵應用于：

分子標識：

已測序基因：脲酶操縱子（ureA, ureB, ureC等，GenBank登錄號：X78411、AF361945）

五、注意事項總結

保存禁忌：避免室溫長期存放，以防菌種失活

污染防控：操作時佩戴防護裝備，凍干管開封需遠離面部

傳代周期：斜面菌種定期轉接；凍干菌長期保存需定期復蘇驗證活性