都是革蘭陽性球菌，微球菌與葡萄球菌怎么區分？
在臨床微生物學實驗室中，區分微球菌（Micrococcus）和葡萄球菌（Staphylococcus）是一項基礎且重要的工作，因為它們在形態上相似（革蘭氏陽性球菌），但臨床意義、致病性和耐藥性截然不同。
以下是系統性的實驗室區分方法，從初步鑒定到確證試驗：
一、初步觀察與鏡檢
革蘭染色：兩者均為革蘭氏陽性球菌，無法區分。
鏡下排列：
葡萄球菌：典型呈不規則的葡萄串狀簇集，分裂面不規則。
微球菌：通常呈四聯狀、成對或成簇，但排列可能更規整，有時也可呈不規則簇集。僅憑形態學不足以可靠區分。
二、關鍵生理生化試驗（核心鑒別方法）
以下試驗組合是區分的核心依據：
| 鑒別試驗 | 微球菌屬 | 葡萄球菌屬 | 備注 |
|---|---|---|---|
氧化酶試驗 | 陽性（90%以上） | 陰性（99%以上） | 最快速、最重要的初篩試驗。取菌落涂抹于氧化酶試紙上，微球菌在10-30秒內變深藍色。 |
觸酶試驗 | 陽性（強陽性） | 陽性 | 兩者均為陽性，故不能用于區分，但可用于與鏈球菌屬區分。微球菌的觸酶反應通常非常強烈。 |
葡萄糖O/F試驗 | 氧化型（O） | 發酵型（F） | 核心鑒別試驗。在O/F培養基中，微球菌僅在有氧條件下產酸（開放管變黃，封閉管不變）；葡萄球菌在有無氧條件下均產酸（兩管均變黃）。 |
溶葡萄球菌素敏感性 | 耐藥 | 敏感 | 特異性高。使用含溶葡萄球菌素（lysostaphin）的紙片，葡萄球菌抑菌圈明顯。 |
呋喃唑酮敏感性 | 敏感 | 耐藥 | 使用100μg呋喃唑酮紙片，微球菌通常有抑菌圈。 |
桿菌肽敏感性 | 敏感 | 耐藥 | 使用0.04U桿菌肽紙片，微球菌通常有抑菌圈。 |
G+C mol%含量 | 高達66-75% | 較低，30-39% | 分子生物學方法，確證用。 |
三、其他輔助鑒別特征
1.菌落特征：
微球菌：菌落常呈黃色、橙色或紅色（色素產生更常見且鮮艷），質地較干燥、凸起。
葡萄球菌：色素可變（金黃色、白色、檸檬色），金黃色葡萄球菌典型為金黃色，但很多凝固酶陰性葡萄球菌為白色。菌落通常較濕潤、光滑。
2.生長條件：
耐鹽試驗：葡萄球菌能在6.5% NaCl肉湯中生長（特別是金黃色葡萄球菌和表皮葡萄球菌），而微球菌一般不能生長。這是很好的鑒別點。
厭氧生長：葡萄球菌能厭氧生長（發酵代謝），微球菌通常為專性需氧菌（氧化代謝）。
3.生化反應：
可用商品化的生化鑒定系統（如API Staph， VITEK GP卡等）。數據庫會自動根據一系列生化反應結果進行區分。
四、臨床意義的考量
葡萄球菌：是常見的致病菌。金黃色葡萄球菌（ coagulase陽性）是重要病原體。凝固酶陰性葡萄球菌（如表皮葡萄球菌）是常見的醫院感染和植入物相關感染病原體。
微球菌：通常被認為是皮膚和環境中的污染菌或定植菌，致病性很弱，極少引起嚴重感染（多見于免疫功能嚴重低下者）。在血培養等無菌部位樣本中分離到時常需謹慎評估其臨床意義。
標準鑒別流程建議
對于臨床分離的革蘭氏陽性球菌，可遵循以下流程：
第一步：進行觸酶試驗。陽性則排除鏈球菌/腸球菌。
第二步：進行氧化酶試驗和葡萄糖O/F試驗。
氧化酶（+）且 O/F為氧化型（O） → 強烈提示為微球菌屬。
氧化酶（-）且 O/F為發酵型（F） → 強烈提示為葡萄球菌屬。
第三步：補充快速試驗驗證：
溶葡萄球菌素/呋喃唑酮敏感性試驗。
6.5% NaCl生長試驗。
第四步（必要時）：
對于葡萄球菌，進行凝固酶試驗以區分金黃色葡萄球菌（陽性）與其他凝固酶陰性葡萄球菌。
使用自動化微生物鑒定系統或MALDI-TOF質譜進行最終鑒定。MALDI-TOF能快速、準確地鑒定到種水平，是目前最有效的方法。
總結：
最簡單有效的初篩組合是：氧化酶試驗（+） + 葡萄糖O/F試驗（氧化型） → 微球菌。而氧化酶試驗（-） + 葡萄糖O/F試驗（發酵型） + 觸酶（+） → 葡萄球菌。
在臨床實驗室中，一旦懷疑為微球菌（尤其來自非無菌部位樣本），通常會直接注釋為“皮膚定植菌”或“污染可能”，而不像對待葡萄球菌那樣進行全套藥敏試驗。
