腸桿菌科的分類及鑒定流程（1）【克氏雙糖鐵（KIA）實驗】

1.克氏雙糖鐵瓊脂（Kligler Iron Agar, KIA）是一種常用的鑒別培養基，主要用于區分腸桿菌科細菌。通過觀察細菌在KIA上的生長和代謝反應，可以推斷細菌的糖發酵能力和硫化氫（H?S）產生能力。

2.原理：

培養基含有葡萄糖和乳糖（1:10），指示劑為酚紅。酚紅在不同的PH值時發生顏色變化，<6.8時變為黃色，ph>8.4時變為紅色。KIA的斜面部分暴露在空氣中，為有氧環境，培養基下部與空氣隔絕是相對厭氧環境。

細菌一般分為以下幾種情況

如細菌只分解葡萄糖，不分解乳糖，起初，細菌分解葡萄糖產酸，可以使斜面和底部都變為黃色。然而，接下來，葡萄糖消耗殆盡，細菌開始利用含氮物質產生堿性物質，抵消了斜面中少量的酸，使得斜面顏色變紅。而底層由于缺氧，氨基酸降解產生的堿性物質無法中和細菌產生的酸，因此仍為黃色。因此，KIA上的堿-斜-酸反應是非乳糖發酵菌的重要標志。

如細菌可以發酵乳糖，那么在葡萄糖被消耗后，仍可以利用乳糖發酵，斜面和底部都會出現黃色。

如細菌產氣，可有氣泡，或者使培養基出現斷層。

如細菌產生H2S，則使培養基形成黑色。